Bundesrecht konsolidiert: Gesamte Rechtsvorschrift für Kosmetik – Analysenverordnung, Fassung vom 16.04.2024

BGBl. Nr. 546/1996 [CELEX-Nr.: 395L0032]Bundesgesetzblatt Nr. 546 aus 1996, [CELEX-Nr.: 395L0032]

BGBl. II Nr. 383/1997 [CELEX-Nr.: 396L0045]Bundesgesetzblatt Teil 2, Nr. 383 aus 1997, [CELEX-Nr.: 396L0045]

Auf Grund der §§ 27 Abs. 1 und 42 Abs. 4 des Lebensmittelgesetzes 1975, BGBl. Nr. 86, zuletzt geändert durch das Bundesgesetz BGBl. Nr. 756/1992, wird verordnet:Auf Grund der Paragraphen 27, Absatz eins und 42 Absatz 4, des Lebensmittelgesetzes 1975, BGBl. Nr. 86, zuletzt geändert durch das Bundesgesetz Bundesgesetzblatt Nr. 756 aus 1992,, wird verordnet:

1. 1.Ziffer eins
   die Probenahme (Anlage 1),
2. 2.Ziffer 2
   die Vorbereitung der Proben im Laboratorium (Anlage 2),
3. 3.Ziffer 3
   den Nachweis und die quantitative Bestimmung des freien Natrium- und Kaliumhydroxids (Anlage 3),
4. 4.Ziffer 4
   den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Oxalsäure und ihrer alkalischen Salze in Haarpflegemitteln (Anlage 4),
5. 5.Ziffer 5
   die Bestimmung des Chloroformgehalts in Zahnpasten (Anlage 5),
6. 6.Ziffer 6
   die Bestimmung des Zinkgehalts (Anlage 6),
7. 7.Ziffer 7
   den Nachweis und die quantitative Bestimmung der Phenolsulfonsäure (Anlage 7),
8. 8.Ziffer 8
   den Nachweis von Oxidationsmitteln und die quantitative Bestimmung von Wasserstoffperoxid in Haarpflegemitteln (Anlage 8),
9. 9.Ziffer 9
   den Nachweis und die halbquantitative Bestimmung von oxidierenden Farbstoffen in Haarfärbemitteln (Anlage 9),
10. 10.Ziffer 10
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Nitrit (Anlage 10),
11. 11.Ziffer 11
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von freiem Formaldehyd (Anlage 11),
12. 12.Ziffer 12
    die quantitative Bestimmung des Resorcingehalts in Shampoos und Haarlotionen (Anlage 12),
13. 13.Ziffer 13
    die quantitative Bestimmung von Methanol im Verhältnis zu Ethanol oder Propanol-2 (Anlage 13),
14. 14.Ziffer 14
    die quantitative Bestimmung von Dichlormethan und 1.1.1-Trichlorethan (Anlage 14),
15. 15.Ziffer 15
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von 8-Chinolinol und dessen Sulfat (Anlage 15),
16. 16.Ziffer 16
    die quantitative Bestimmung von Ammoniak (Anlage 16),
17. 17.Ziffer 17
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Nitromethan (Anlage 17),
18. 18.Ziffer 18
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Thioglykolsäure in Dauerwellenpräparaten, Haarentkräuselungsmitteln und Enthaarungsmitteln (Anlage 18),
19. 19.Ziffer 19
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Hexachlorophen (Anlage 19),
20. 20.Ziffer 20
    die quantitative Bestimmung von Tosylchloramidum natricum (Anlage 20),
21. 21.Ziffer 21
    die quantitative Bestimmung von Gesamtfluorid in Zahnpasten (Anlage 21),
22. 22.Ziffer 22
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von quecksilberorganischen Verbindungen (Anlage 22),
23. 23.Ziffer 23
    die quantitative Bestimmung von Alkali- und Erdalkalisulfiden (Anlage 23),
24. 24.Ziffer 24
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Glycerin-1-(4aminobenzoat) (Anlage 24),
25. 25.Ziffer 25
    die quantitative Bestimmung von Chlorbutanol (Anlage 25),
26. 26.Ziffer 26
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Chinin (Anlage 26),
27. 27.Ziffer 27
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von anorganischen Sulfiten und Bisulfiten (Anlage 27),
28. 28.Ziffer 28
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Alkalichloraten (Anlage 28),
29. 29.Ziffer 29
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Natriumjodat (Anlage 29),
30. 30.Ziffer 30
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Silbernitrat (Anlage 30)
31. 31.Ziffer 31
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Selensulfid in Antischuppen-Shampoos (Anlage 31)
32. 32.Ziffer 32
    die quantitative Bestimmung von löslichem Barium und Strontium in Farbpigmenten in Form von Salzen oder Lacken (Anlage 32)
33. 33.Ziffer 33
    den Nachweis und die Bestimmung von Benzylalkohol (Anlage 33)
34. 34.Ziffer 34
    den Nachweis von Zirkonium und die Bestimmung von Zirkonium, Aluminium und Chlor in nichtaerosolförmigen Antitranspirantien (Anlage 34)
35. 35.Ziffer 35
    den Nachweis und die Bestimmung von Hexamidin, Dibromhexamidin, Dibrompropamidin und Chlorhexidin (Anlage 35)
36. 36.Ziffer 36
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Benzoesäure, 4-Hydroxybenzoesäure, Sorbinsäure, Salicylsäure und Propionsäure (Anlage 36),
37. 37.Ziffer 37
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von Hydrochinon, Hydrochinonmonomethylether, Hydrochinonmonoethylether und Hydrochinonmonobenzylether (Anlage 37)
38. 38.Ziffer 38
    den Nachweis und die quantitative Bestimmung von 2-Phenoxyethanol, 1-Phenoxypropan-2-ol, Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl- und Benzyl-4-hydroxybenzoat (Anlage 38)

____________________

*) Als gleichwertig sind Analysenmethoden anzusehen, die im Rahmen der jeweiligen Fragestellung vergleichbare Ergebnisse liefern. Vergleichbare Ergebnisse sind jedenfalls dann zu erwarten, wenn die in der Verordnung genannten Verfahrenskenndaten von angewandten Verfahren erreicht oder übertroffen werden.

Anlage 1 I. PROBENAHME VON KOSMETISCHEN MITTELNrömisch eins. PROBENAHME VON KOSMETISCHEN MITTELN

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Diese Vorschrift beschreibt die Probenahme von kosmetischen Mitteln, die in den verschiedenen Laboratorien untersucht werden.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITIONEN

   Einzelprobe:

   Einheit, die aus einer zum Verkauf bestimmten Partie entnommen ist;

   Gesamtprobe:

   Summe aller Einzelproben mit demselben Herstellungskennzeichen;

   Laborprobe:

   Teilmenge der Gesamtprobe, die für die einzelnen Laboratorien bestimmt ist;

   Versuchsmenge:

   der für eine Analyse erforderliche Teil der Laborprobe;

   Behältnis:

   Gegenstand, der ein Erzeugnis enthält, und der mit dem Erzeugnis ständig in Berührung kommt.
3. 3.Ziffer 3
   PROBENAHME
4. 3.1.3 Punkt eins
   Kosmetische Mittel werden in ihrer Originalpackung entnommen und unverändert dem Laboratorium zugeleitet.
5. 3.2.3 Punkt 2
   Bei kosmetischen Mittel die in Großpackungen oder im Einzelverkauf nicht in der Originalpackung des Herstellers auf den Markt gebracht werden, werden für die Probenahme am Ort, ihrer Verwendung bzw. des Verkaufs besondere Vorschriften erlassen.
6. 3.3.3 Punkt 3
   Aus der Analysenvorschrift und der Zahl der durch jedes Laboratorium vorzunehmenden Analysen ergibt sich die Anzahl an Einzelproben, die für eine Laborprobe erforderlich sind.
7. 4.Ziffer 4
   IDENTIFIZIERUNG DER PROBEN
8. 4.1.4 Punkt eins
   Die Proben sind am Ort der Probenahme gemäß den geltenden Vorschriften des betreffenden Mitgliedstaats, in dem die Probenahme erfolgt, zu versiegeln und zu identifizieren.
9. 4.2.4 Punkt 2
   Auf jeder Probe sind folgende Angaben anzubringen:

   • –Strichaufzählung
     Name des kosmetischen Mittels,
   • –Strichaufzählung
     Datum, Stunde und Ort der Probenahme,
   • –Strichaufzählung
     Name der mit der Probenahme beauftragten Person,
   • –Strichaufzählung
     Name der die Untersuchung durchführenden Behörde.
10. 4.3.4 Punkt 3
    Über die Probenahme wird gemäß den in dem betreffenden Mitgliedstaat geltenden Vorschriften ein Bericht erstellt.
11. 5.Ziffer 5
    LAGERUNG DER PROBEN
12. 5.1.5 Punkt eins
    Die Einzelproben sind entsprechend den vom Hersteller auf dem Etikett angegebenen Anweisungen zu lagern.
13. 5.2.5 Punkt 2
    Sofern keine besonderen Anweisungen bestehen, sind alle Laborproben bei einer Temperatur zwischen 10 °C und 25 °C und lichtgeschützt aufzubewahren.
14. 5.3.5 Punkt 3
    Die Einzelproben sind erst im Augenblick des Analysebeginns zu öffnen.

Anlage 2 II. VORBEREITUNG DER PROBEN IM LABORATORIUMrömisch II. VORBEREITUNG DER PROBEN IM LABORATORIUM

1. 1.Ziffer eins
   ALLGEMEINES
2. 1.1.eins Punkt eins
   Die Analysebestimmung wird an jeder Einzelprobe durchgeführt. Sofern die Menge zu klein ist, wird eine Mindestzahl von Einzelproben sorgfältig gemischt, bevor die Laborprobe entnommen wird.
3. 1.2.eins Punkt 2
   Das Behältnis wird geöffnet – sofern es die entsprechende Analysemethode vorsieht unter inerter Atmosphäre – und die für die Analyse notwendigen Versuchsmengen möglichst rasch entnommen. Danach werden die Analysen unverzüglich durchgeführt. Wenn die Probe konserviert werden muß, wird das Behältnis unter inerter Atmosphäre wieder verschlossen.
4. 1.3.eins Punkt 3
   Kosmetische Mittel können in flüssigem, festem oder pastösem Zustand sein. Es kann vorkommen, daß ursprünglich homogene Erzeugnisse später in mehreren Phasen vorliegen. In solchen Fällen müssen sie erneut homogenisiert werden.
5. 1.4.eins Punkt 4
   Sofern ein kosmetisches Mittel auf besondere Weise zum Verkauf angeboten wird, so daß nicht im Einklang mit diesen Vorschriften verfahren werden kann, und sofern keine zutreffenden Untersuchungsmethoden bestehen, kann nach eigenen Methoden verfahren werden, wenn diese in schriftlicher Form als Teil des Analyseberichts festgelegt werden.
6. 2.Ziffer 2
   FLÜSSIGPHASEN
7. 2.1.2 Punkt eins
   In diesem Zustand befinden sich Erzeugnisse wie „Eau de toilette“, Lotionen, Lösungen, Öle, milchige Zubereitungen, die in Flakons, Flaschen, Ampullen oder Tuben verpackt sind.
8. 2.2.2 Punkt 2
   Entnahme der Versuchsmenge:

   • –Strichaufzählung
     Vor dem Öffnen das Behältnis kräftig schütteln.
   • –Strichaufzählung
     Öffnen.
   • –Strichaufzählung
     Einige Milliliter der Flüssigkeit werden zur visuellen Prüfung in ein Reagenzröhrchen gegeben, um festzustellen, welche Eigenschaften das Erzeugnis bei der Entnahme der Versuchsmenge hat.
   • –Strichaufzählung
     Behältnis wieder verschließen oder die benötigte Versuchsmenge entnehmen.
   • –Strichaufzählung
     Behältnis wieder sorgfältig verschließen.
9. 3.Ziffer 3
   PASTÖSE PHASEN
10. 3.1.3 Punkt eins
    In diesem Zustand befinden sich Erzeugnisse wie Pasten, Cremes, Emulsionen und Gele, die in Tuben, Druckflaschen oder Tiegel verpackt sind.
11. 3.2.3 Punkt 2
    Entnahme der Versuchsmenge:

    Zwei Fälle sind möglich:
12. 3.2.1.3 Punkt 2 Punkt eins
    Behältnisse mit enger Öffnung (Tube, Druckflasche). Mindestens den ersten Zentimeter des zu analysierenden Produkts beseitigen. Versuchsmenge entnehmen und Behältnis sofort wieder verschließen.
13. 3.2.2.3 Punkt 2 Punkt 2
    Behältnis mit weiter Öffnung (Tiegel). Oberfläche leicht wegschaben, um die oberste Schicht zu entfernen. Die Versuchsmenge entnehmen und das Behältnis sofort wieder verschließen.
14. 4.Ziffer 4
    FESTE PHASEN
15. 4.1.4 Punkt eins
    In diesem Zustand befinden sich Erzeugnisse wie Puder, Kompaktpuder oder Stifte, die in Schachteln oder Dosen verpackt sein können.
16. 4.2.4 Punkt 2
    Entnahme der Versuchsmenge:

    Zwei Fälle sind möglich:
17. 4.2.1.4 Punkt 2 Punkt eins
    Puder. Vor dem Entstöpseln oder Öffnen Puder kräftig schütteln. Öffnen und Versuchsmenge entnehmen.
18. 4.2.2.4 Punkt 2 Punkt 2
    Kompaktpuder oder Stift. Durch leichtes Schaben Oberfläche des festen Körpers entfernen und Versuchsmenge entnehmen.
19. 5.Ziffer 5
    DRUCKGASPACKUNGEN (Aerosole)
20. 5.1.5 Punkt eins
    Diese Erzeugnisse sind in § 2 der Aerosolpackungsverordnung, BGBl. Nr. 560/1994 i.d.j.g.F, definiert.Diese Erzeugnisse sind in Paragraph 2, der Aerosolpackungsverordnung, Bundesgesetzblatt Nr. 560 aus 1994, i.d.j.g.F, definiert.
21. 5.2.5 Punkt 2
    Laborprobe:

    Die Druckgaspackung wird zunächst kräftig geschüttelt. Sodann wird eine repräsentative Menge des Inhalts mittels eines Anschlußstücks (siehe Abbildung 1) in eine mit einem Aerosolventil ausgestattete kunststoffbeschichtete durchsichtige Flasche übergeleitet. Die Flasche besitzt kein Steigrohr. In Sonderfällen kann die Analysenmethode die Verwendung anderer Anschlußstücke vorsehen. Durch dieses Überleiten wird der Inhalt der Druckgaspackung gut sichtbar. Vier Fälle sind möglich:
22. 5.2.1.5 Punkt 2 Punkt eins
    Der Inhalt ist eine homogene Lösung. Er ist als solcher für die weitere Analyse direkt verwendbar.
23. 5.2.2.5 Punkt 2 Punkt 2
    Der Inhalt besteht aus zwei Flüssigphasen. Jede einzelne Phase kann nach dem Umfüllen der untersten Phase in eine zweite Aufnahmeflasche analysiert werden. Beim Umfüllen muß die erste Aufnahmeflasche mit dem Ventil nach unten gehalten werden. Die untere Phase ist häufig wäßrig und enthält kein Treibgas mehr (Fall Butan/Wasser).
24. 5.2.3.5 Punkt 2 Punkt 3
    Der Inhalt besteht aus einem Puder in Suspension. Nach Abtrennung des Puders kann die Flüssigphase analysiert werden.
25. 5.2.4.5 Punkt 2 Punkt 4
    Aerosolschaum. In die Aufnahmeflasche wird eine Menge von ca. 5 bis 10 Gramm 2-Methoxyäthanol genau eingewogen. Dieser Stoff verhindert bei der Entgasung die Schaumbildung, so daß die Treibgase ohne Flüssigkeitsverlust abgetrennt werden können.
26. 5.3.5 Punkt 3
    Hilfsmittel

    Das Anschlußstück P1 (siehe Abbildung 1) wird aus Duraluminium oder aus Messing angefertigt. Es ist so beschaffen, daß es mittels eines Anschlußstücks aus Polyäthylen an die unterschiedlichen Ventilsysteme paßt (siehe Abbildungen 2 und 3). Die Aufnahmeflasche (siehe Abbildung 4) besteht aus weißem Glas, das außen mit einer durchsichtigen Kunststoffschutzschicht überzogen ist. Der Flascheninhalt beträgt 50 bis 100 ml. Die Flasche ist mit dem Ventil, aber ohne Steigrohr ausgestattet.
27. 5.4.5 Punkt 4
    Verfahren

    Um eine ausreichende Menge überzuleiten, ist es erforderlich, die Luft aus der Flasche zu verdrängen. Zu diesem Zweck werden mittels des Anschlußstücks P1 ungefähr 10 ml Dichlordifluormethan oder Butan (je nach Art des zu untersuchenden Aerosols) eingefüllt. Dieses läßt man bis zum vollkommenen Verschwinden der flüssigen Phase verdampfen; die Flasche ist dabei mit dem Ventil nach oben zu halten. Das Anschlußstück wird abgetrennt und die Aufnahmeflasche gewogen („a“ Gramm). Die Druckgaspackung, von der eine Probe entnommen werden soll, wird kräftig geschüttelt. Nun wird das Anschlußstück P1 auf das Ventil der Druckgasflasche aufgesetzt (Ventil nach oben), dann die Aufnahmeflasche Pt (Hals nach unten) auf das Anschlußstück P1 angeschlossen und gedrückt. Auf diese Weise wird die Aufnahmeflasche bis zu etwa gefüllt. Wird die Überleitung aufgrund eines Druckausgleichs vorzeitig unterbrochen, so kann sie durch Abkühlen der Aufnahmeflasche fortgesetzt werden. Das Anschlußstück P1 wird abgenommen, die gefüllte Aufnahmeflasche gewogen („b“ Gramm) und das Gewicht des übergeleiteten Erzeugnisses (m1) ermittelt (m1 = b – a).

    Die auf diese Weise erhaltene Probe kann verwendet werden:

    1. 1.Ziffer eins
       für die übliche chemische Analyse,
    2. 2.Ziffer 2
       für eine gaschromatographische Analyse der flüchtigen Bestandteile.
28. 5.4.1.5 Punkt 4 Punkt eins
    Chemische Analyse

    Mit der Aufnahmeflasche – Hals nach oben – wird nun wie folgt verfahren:

    • –Strichaufzählung
      Verdampfen. Wenn durch die Verdampfung Schaum gebildetwird, so ist eine Aufnahmeflasche zu verwenden, in die zuvor mittels einer Injektionsspritze durch das Anschlußstück P1 eine bekannte Menge von 2-Methoxyäthanol (ca. 5 bis 10 g) eingegeben wird.
    • –Strichaufzählung
      Die quantitative Abtrennung der flüchtigen Bestandteile wird durch Bewegen im Wasserbad von 40° C vervollständigt.
    • –Strichaufzählung
      Nach erneutem Wiegen der Aufnahmeflasche („c“ Gramm) wird das Gewicht des Rückstands (m2) ermittelt (m2 = c – a).

      (Bei der Berechnung des Gewichts des Rückstands ist gegebenenfalls die Menge des zugegebenen Methoxyäthanols zu berücksichtigen.)
    • –Strichaufzählung
      Anschlußstück P1 von der Aufnahmeflasche abnehmen;
    • –Strichaufzählung
      Rückstand in einer bekannten Menge eines geeigneten Lösungsmittels quantitativ lösen;
    • –Strichaufzählung
      Durchführung der gewünschten Analyse an einer aliquoten Teilmenge.

    Formeln für die Berechnung:

1. m1Sub-Litera, m, eins
   = das Gewicht des in die Aufnahmeflasche übergeleiteten Erzeugnisses,
2. m2Sub-Litera, m, 2
   = das Gewicht des Rückstands nach Erwärmen bei 40° C,
3. rLitera r
   = Prozentanteil der enthaltenen Substanz in m2 (Bestimmung durch geeignete Methode),
4. RR
   = Prozentanteil der enthaltenen Substanz im gesamten Erzeugnis,
5. QQ
   = absolute Gesamtmenge der enthaltenen Substanz in der Druckgaspackung,
6. PP
   = Nettogewicht der ursprünglichen Druckgaspackung.

1. 5.4.2.5 Punkt 4 Punkt 2
   Gaschromatographische Analyse der flüchtigen Bestandteile
2. 5.4.2.1.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt eins
   Prinzip

   Aus der Aufnahmeflasche Pt wird mittels einer Injektionsspritze zur Gaschromatographie eine ausreichende Menge an Flüssigkeit entnommen. Der Inhalt der Spritze wird sodann in den Chromatograph injiziert.
3. 5.4.2.2.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt 2
   Hilfsmittel

   Injektionsspritze zur Gaschromatographie (Abbildung 5) „Precision sampling“, Serie A2 (oder gleichwertige Spritze). Diese Spritze ist an ihrem Nadelende mit einem Verschlußhahn versehen. Die Spritze ist mit der Aufnahmeflasche durch das Anschlußstück P1 und durch ein Polyäthylen-Röhrchen (Länge 8 mm, Durchmesser 2,5 mm) verbunden.
4. 5.4.2.3.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt 3
   Verfahren

   Nach Überleitung einer ausreichenden Menge des Erzeugnisses in die Aufnahmeflasche mittels des Anschlußstücks P1 wird das konische Ende der Spritze, wie unter 5.4.2.2 beschrieben, auf die Aufnahmeflasche aufgesetzt. Bei geöffnetem Verschlußhahn wird eine ausreichende Menge an Flüssigkeit angesaugt; Gasblasen durch wiederholtes Hin- und Herbewegen des Kolbens entfernt (erforderlichenfalls Kühlen der Spritze). Wenn die Spritze eine ausreichende Menge an blasenfreier Flüssigkeit enthält, wird der Verschlußhahn geschlossen und die Spritze von der Aufnahmeflasche gelöst. Nun wird eine Nadel aufgesetzt, die Spritze in das Einlaßsystem der Chromatographen eingeführt, der Verschlußhahn geöffnet und injiziert.
5. 5.4.2.4.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt 4
   Interner Standard

   Sofern die Anwendung eines internen Standards erforderlich ist, so kann dieser ebenfalls mit Hilfe einer Spritze und eines Anschlußstücks in die Aufnahmeflasche eingegeben werden.

Anlage 3 III. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG DES FREIEN NATRIUM- UND KALIUMHYDROXIDSrömisch III. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG DES FREIEN NATRIUM- UND KALIUMHYDROXIDS

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode beschreibt die Identifizierung signifikanter Mengen freier Natrium- und/ oder Kaliumhydroxide in kosmetischen Mitteln und die quantitative Bestimmung des freien Natrium- und Kaliumhydroxids in Entkräuselungsmitteln und Nagelhautentfernern.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Freies Natrium- und Kaliumhydroxid wird durch die bei der Neutralisation des kosmetischen Mittels unter den vorgeschriebenen Bedingungen verbrauchte (eingestellte) Säuremenge bestimmt. Die titrierte Menge wird als freies Natriumhydroxid angegeben.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Die Probe wird in Wasser gelöst oder dispergiert und mit einer eingestellten Säure titriert. Die pH-Wertänderung wird im Verlauf der Säurezugabe registriert. Bei einer einfachen Natrium- oder Kaliumhydroxidlösung entspricht der Endpunkt einer eindeutigen maximalen neutralisierten Mengedes registrierten pH-Wertes.

   Die normale Titrationskurve kann verändert werden durch die Anwesenheit von

   1. a)Litera a
      Ammoniak und andere schwache organische Basen, die selbst eine verhältnismäßig flache Titrationskurve aufweisen. Ammoniak wird bei dieser Methode durch Verdampfen bei vermindertem Druck bei Zimmertemperatur entfernt;
   2. b)Litera b
      Salzen schwacher Säuren, die eine Titrationskurve mit mehren Umschlagspunkten ergeben können. In solchen Fällen entspricht nur der erste Teil der Kurve bis zu dem ersten Umschlagspunkt der Neutralisation des Hydroxid-Ions durch das freie Natrium- oder Kaliumhydroxid.

   Ein Alternativverfahren – die Titration in alkoholischer Lösung – ist dort anzuwenden, wo eine größere Störung durch Salze schwacher Säuren verursacht wird.

   Auch wenn theoretisch die Möglichkeit besteht, daß andere lösliche starke Basen, wie zum Beispiel Lithiumhydroxid und quaternäre Ammoniumhydroxide einen hohen pH-Wert verursachen könnten, ist ihre Anwesenheit in kosmetischen Mitteln dieser Art sehr unwahrscheinlich.
4. 4.Ziffer 4
   IDENTIFIZIERUNG
5. 4.1.4 Punkt eins
   Reagenzien
6. 4.1.1.4 Punkt eins Punkt eins
   standardisierte alkalische Pufferlösung mit einem pH von 9,18:0,05 M Natriumtetraborat-Dekahydrat.
7. 4.2.4 Punkt 2
   Apparative Ausrüstung
8. 4.2.1.4 Punkt 2 Punkt eins
   übliche Laborgläser
9. 4.2.2.4 Punkt 2 Punkt 2
   pH-Meter
10. 4.2.3.4 Punkt 2 Punkt 3
    Glaselektrode
11. 4.2.4.4 Punkt 2 Punkt 4
    standardisierte Kalomelelektrode.
12. 4.3.4 Punkt 3
    Verfahren

    Die Eichung des pH-Meters erfolgt mit Hilfe der Pufferlösung (4.1.1).

    Eine 10%ige Lösung oder Dispersion der Probe ist in Wasser anzusetzen und abzufiltern; der pH-Wert ist zu messen. Bei einem pH-Wert von ≥ 12 ist eine quantitative Bestimmung vorzunehmen.
13. 5.Ziffer 5
    QUANTITATIVE BESTIMMUNG
14. 5.1.5 Punkt eins
    Titration in wäßriger Lösung
15. 5.1.1.5 Punkt eins Punkt eins
    Reagenzien
16. 5.1.1.1.5 Punkt eins Punkt eins Punkt eins
    0,1 N HCl.
17. 5.1.2.5 Punkt eins Punkt 2
    Apparative Ausrüstung
18. 5.1.2.1.5 Punkt eins Punkt 2 Punkt eins
    übliche Laborgläser
19. 5.1.2.2.5 Punkt eins Punkt 2 Punkt 2
    pH-Meter, eventuell mit Schreiber
20. 5.1.2.3.5 Punkt eins Punkt 2 Punkt 3
    Glaselektrode
21. 5.1.2.4.5 Punkt eins Punkt 2 Punkt 4
    standardisierte Kalomelelektrode.
22. 5.1.3.5 Punkt eins Punkt 3
    Verfahren

    In ein 150-ml-Becherglas werden etwa 0,5 bis 1,0 g der Probe genau eingewogen. Nach Zugabe einiger Siedesteinchen wird das Becherglas, sofern Ammoniak vorhanden ist – in einen Vakuumexsikkator gestellt und mit einer Wasserstrahlpumpe drei Stunden lang evakuiert, bis kein Ammoniakgeruch mehr wahrnehmbar ist. Danach werden 100 ml Wasser hinzugefügt, der Rückstand homogenisiert und mit 0,1 N Salzsäure (5.1.1.1) titriert. Die Änderung des pH-Wertes ist zu registrieren (5.1.2.2).
23. 5.1.4.5 Punkt eins Punkt 4
    Berechnung

    Die Titrationskurve wird aufgenommen und die Umschlagspunkte abgelesen. Tritt der erste Umschlagspunkt bei einem pH-Wert unter 7 auf, so ist die Probe frei von Natrium- oder Kaliumhydroxid. Bei zwei oder mehr Umschlagspunkten sind nur die ersten relevant.

    Das Titransvolumen bis zu dem ersten Umschlagspunkt ist festzustellen.

    Wenn V das Titransvolumen in ml,Wenn römisch fünf das Titransvolumen in ml,

    M die Masse dieses Probenteils in Gramm bedeuten, dann ist die Konzentration von Natrium- und/oder Kaliumhydroxiden in der Probe, ausgedrückt in Masseprozent von Natriumhydroxid:

1. 5.2.5 Punkt 2
   Titration in Isopropanol
2. 5.2.1.5 Punkt 2 Punkt eins
   Reagenzien
3. 5.2.1.1.5 Punkt 2 Punkt eins Punkt eins
   Isopropanol
4. 5.2.1.2.5 Punkt 2 Punkt eins Punkt 2
   1 N HCl
5. 5.2.1.3.5 Punkt 2 Punkt eins Punkt 3
   0,1 N HCl in Isopropanol: Unmittelbar vor dem Gebrauch durch Verdünnung der wässerigen 1,0 N HCl mit Isopropanol anzusetzen.
6. 5.2.2.5 Punkt 2 Punkt 2
   Apparative Ausrüstung
7. 5.2.2.1.5 Punkt 2 Punkt 2 Punkt eins
   übliche Laborgläser
8. 5.2.2.2.5 Punkt 2 Punkt 2 Punkt 2
   pH-Meter, eventuell mit Schreiber
9. 5.2.2.3.5 Punkt 2 Punkt 2 Punkt 3
   Glaselektrode
10. 5.2.2.4.5 Punkt 2 Punkt 2 Punkt 4
    standardisierte Kalomelelektrode.
11. 5.2.3.5 Punkt 2 Punkt 3
    Verfahren

    In einem 150-ml-Becherglas werden etwa 0,5 bis 1,0 g der Probe genau eingewogen. Nach Zugabe einiger Siedesteinchen wird das Becherglas – sofern Ammoniak vorhanden ist – in einen Vakuumexsikkator gestellt und mit einer Wasserstrahlpumpe drei Stunden lang evakuiert, bis kein Ammoniakgeruch mehr wahrnehmbar ist. Danach werden 100 ml Isopropanol hinzugefügt, der Rückstand homogenisiert und mit 0,1 N HCl in Isopropanol (5.2.1.3) titriert. Die Änderung des pH-Wertes (5.2.2.2) ist zu registrieren.
12. 5.2.4.5 Punkt 2 Punkt 4
    Berechnung

    Wie in (5.1.4) tritt der erste Umschlagspunkt bei einem pH-Wert von etwa 9 auf.
13. 5.3.5 Punkt 3
    Wiederholbarkeit (1)

    Bei einem Gehalt von 5% m/m darf der Unterschied zwischen den Ergebnissen zweier Parallelbestimmungen an derselben Probe nicht höher sein als 0,25%.

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(1) Siehe Norm ISO/DIS 5725.

Anlage 4 IV. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON OXALSÄURE UND IHRER ALKALISCHEN SALZE IN HAARPFLEGEMITTELNrömisch IV. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON OXALSÄURE UND IHRER ALKALISCHEN SALZE IN HAARPFLEGEMITTELN

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Die im folgenden beschriebene Methode ist für die quantitative und qualitative Bestimmung von Oxalsäure und deren Alkalisalze in Haarpflegemitteln geeignet. Sie kann in farblosen, wässerigen oder wässerigalkoholischen Lösungen und Lotionen, die etwa 5 % Oxalsäure oder eine äquivalente Menge deren Alkalisalze enthalten, verwendet werden.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Die nach dieser Methode bestimmten Gehalte der Oxalsäure und/oder ihrer Alkalisalze werden in Massenprozent (m/m) angegeben.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Nach der Entfernung eventuell anwesender anionaktiver Tenside mittels p-Toluidinhydrochlorid wird die Oxalsäure und/oder ihre Alkalisalze gefällt und die Lösung filtriert. Der Niederschlag wird in Schwefelsäure gelöst und mit Kaliumpermanganat titriert.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Ammoniumacetatlösung: 5%ig (m/m)
6. 4.2.4 Punkt 2
   Calciumchloridlösung: 10%ig (m/m)
7. 4.3.4 Punkt 3
   Äthanol: 95%ig (v/v)
8. 4.4.4 Punkt 4
   Tetrachlorkohlenstoff
9. 4.5.4 Punkt 5
   Diäthyläther
10. 4.6.4 Punkt 6
    p-Toluidinhydrochloridlösung: 6,8%ig (m/m)
11. 4.7.4 Punkt 7
    0,1 N Kaliumpermanganatlösung
12. 4.8.4 Punkt 8
    Schwefelsäure: 20%ig (m/m)
13. 4.9.4 Punkt 9
    Salzsäure: 10%ig (m/m)
14. 4.10.4 Punkt 10
    Natriumacetat . 3H2O
15. 4.11.4 Punkt 11
    Eisessig
16. 4.12.4 Punkt 12
    Schwefelsäure (1:1)
17. 4.13.4 Punkt 13
    Bariumhydroxidlösung (gesättigt).
18. 5.Ziffer 5
    GERÄTE
19. 5.1.5 Punkt eins
    Scheidetricher: 500 ml
20. 5.2.5 Punkt 2
    Bechergläser: 50 und 600 ml
21. 5.3.5 Punkt 3
    Glasfiltertiegel: G-4
22. 5.4.5 Punkt 4
    Meßzylinder: 25 und 100 ml
23. 5.5.5 Punkt 5
    Pipetten: 10 ml
24. 5.6.5 Punkt 6
    Saugflasche: 500 ml
25. 5.7.5 Punkt 7
    Wasserstrahlpumpe
26. 5.8.5 Punkt 8
    Thermometer: 0 bis 100 °C
27. 5.9.5 Punkt 9
    Magnetrührer mit Heizelement
28. 5.10.5 Punkt 10
    Magnetrührstäbchen, teflonbeschichtet
29. 5.11.5 Punkt 11
    Bürette: 25 ml
30. 5.12.5 Punkt 12
    Erlenmeyerkolben: 250 ml.
31. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
32. 6.1.6 Punkt eins
    6 bis 7 g der Probe werden in ein 50-ml-Becherglas eingewogen, mit verdünnter Salzsäure (4.9) auf pH = 3 eingestellt und dann die Lösung mit 100 ml destilliertem Wasser in einen Scheidetrichter überführt. Anschließend werden 25 ml Äthanol (4.3), 25 ml p-Toluidinhydrochloridlösung (4.6) sowie 25 bis 30 ml Tetrachlorkohlenstoff (4.4) hinzugefügt und die Mischung kräftig geschüttelt.
33. 6.2.6 Punkt 2
    Nach der Trennung der Phasen wird die untere Schicht (organische Phase) verworfen, die Extraktion mit den unter 6.1 genannten Reagenzien wiederholt und die organische Phase erneut verworfen.
34. 6.3.6 Punkt 3
    Die wässerige Lösung wird in ein 600-ml-Becherglas gespült und der noch in der Lösung enthaltene Tetrachlorkohlenstoff verkocht.
35. 6.4.6 Punkt 4
    Anschließend werden 50 ml Ammoniumacetatlösung (4.1) hinzugegeben, die Lösung zum Sieden erhitzt (5.9) und zu der kochenden Lösung 10 ml erwärmte Calciumchloridlösung (4.2) unter Rühren hinzugefügt; den Niederschlag läßt man absetzen.
36. 6.5.6 Punkt 5
    Die vollständige Fällung wird durch Zusatz einiger Tropfen Calciumchloridlösung (4.2) geprüft. Man läßt auf Zimmertemperatur abkühlen, fügt unter Rühren (5.10) 200 ml Äthanol (4.3) hinzu und läßt diese Lösung 30 Minuten lang stehen.
37. 6.66 Punkt 6
    Die Flüssigkeit wird durch einen Glasfiltertiegel (5.3) filtriert, der Niederschlag mit einer kleinen Menge warmem Wasser (50 bis 60 °C) in den Glasfiltertiegel eingebracht und mit kaltem Wasser gewaschen.
38. 6.7.6 Punkt 7
    Anschließend wird der Niederschlag noch fünfmal mit wenig Methanol (4.3) und etwas Diäthyläther (4.5) nachgewaschen, danach in 50 ml heißer Schwefelsäure (4.8) gelöst und die Lösung durch einen Filtertiegel gesaugt.
39. 6.8.6 Punkt 8
    Die Lösung wird quantitativ in einen Erlenmeyerkolben (5.12) überführt und mit Kaliumpermanganatlösung (4.7) bis zur schwachen Rosafärbung titriert.
40. 7.Ziffer 7
    BERECHNUNG

    Der Oxalsäuregehalt der Probe wird in Massenprozent nach der folgenden Formel berechnet:

1. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Bei einem Oxalsäuregehalt von etwa 5% (m/m) darf der Unterschied zwischen den Ergebnissen von zwei Parallelbestimmungen an der gleichen Probe 0,15% nicht überschreiten.
2. 9.Ziffer 9
   NACHWEIS
3. 9.1.9 Punkt eins
   Prinzip

   Oxalsäure und/oder ihre Alkalisalze werden als Calciumoxalat gefällt und in Schwefelsäure gelöst. Der Lösung wird wenig Kaliumpermanganatlösung hinzugegeben, das durch Oxalat unter Freisetzen von Kohlensäure entfärbt wird. Durch Einleiten der Kohlensäure in Bariumhydroxidlösung entsteht ein weißer Niederschlag (Trübung) von Bariumcarbonat.
4. 9.2.9 Punkt 2
   Verfahren
5. 9.2.1.9 Punkt 2 Punkt eins
   Ein Teil der Probe wird nach 6.1 bis 6.3 behandelt; eventuell enthaltene waschaktive Substanzen werden auf diese Weise entfernt.
6. 9.2.2.9 Punkt 2 Punkt 2
   Etwa 10 ml der nach 9.2.1 erhaltenen Lösung wird eine Spatelspitze Natriumacetat (4.10) zugegeben und die Lösung mit einigen Tropfen Eisessig (4.11) angesäuert.
7. 9.2.3.9 Punkt 2 Punkt 3
   Dieser Lösung wird eine 10%ige Calciumchloridlösung (4.2) zugegeben und danach die Lösung filtriert. Der Calciumoxalatniederschlag wird in 2 ml Schwefelsäure 1 : 1 (4.12) gelöst.
8. 9.2.4.9 Punkt 2 Punkt 4
   Die Lösung wird in ein Reagenzglas eingegeben und tropfenweise etwa 0,5 ml 0,1 N Kaliumpermanganatlösung hinzugefügt. Bei Gegenwart von Oxalat entfärbt sich diese Lösung erst langsam und dann schnell.
9. 9.2.5.9 Punkt 2 Punkt 5
   Nach der Zugabe der Kaliumpermanganatlösung (4.7) wird das Reagenzglas sofort mit einem geeigneten Stopfen mit einem Glasröhrchen verschlossen, leicht erwärmt und die freigesetzte Kohlensäure in gesättigte Bariumhydroxidlösung (4.13) eingeleitet. Die Bildung einer weißen Trübung von Bariumcarbonat innerhalb von 3 bis 5 Minuten zeigt das Vorhandensein von Oxalsäure an.

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(1) Siehe Norm ISO/DIS 5725.

Anlage 5 V. BESTIMMUNG DES CHLOROFORMGEHALTS IN ZAHNPASTENrömisch fünf. BESTIMMUNG DES CHLOROFORMGEHALTS IN ZAHNPASTEN

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode beschreibt die gaschromatographische Bestimmung von Chloroform in Zahnpasten. Sie eignet sich für die Bestimmung eines Chloroformgehalts bis zu 5 %.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Das nach dieser Arbeitsvorschrift bestimmte Chloroform wird in Massenprozent des Erzeugnisses ausgedrückt.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Die Zahnpasta wird in einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol, dem eine bekannte Menge Acetonitril als interner Standard zugegeben ist, suspendiert und zentrifugiert. Ein Teil der flüssigen Phase wird gaschromatographisch analysiert und danach der Chloroformgehalt berechnet.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Porapak Q oder Chromosorb 101, 80–100 mesh oder gleichwertiges Material
6. 4.2.4 Punkt 2
   Acetonitril
7. 4.3.4 Punkt 3
   Chloroform
8. 4.4.4 Punkt 4
   Dimethylformamid
9. 4.5.4 Punkt 5
   Methanol
10. 4.6.4 Punkt 6
    Lösung für den internen Standard:

    Mit einer Pipette werden 5 ml Dimethylformamid (4.4) in einen 50-ml-Meßkolben eingegeben und hierzu etwa 300 mg (M) Acetonitril genau eingewogen. Danach wird bis zur Marke mit Dimethylformamid aufgefüllt und gemischt.
11. 4.7.4 Punkt 7
    Lösung zur Bestimmung des relativen Ansprechfaktors:

    5,0 ml der internen Standardlösung (4.6) werdem (Anm.: richtig: werden)Anmerkung, richtig: werden) mit einer Pipette in einen 10-ml-Meßkolben gegeben, hierzu etwa 300 mg (M1) Chloroform (4.3) genau eingewogen und bis zur Marke mit Dimethylformamid aufgefüllt.
12. 5.Ziffer 5
    GERÄTE
13. 5.1.5 Punkt eins
    Analysenwaage
14. 5.2.5 Punkt 2
    Gaschromatograph mit Flammenionisationsdetektor
15. 5.3.5 Punkt 3
    Injektionsspritze: 5 bis 10 l mit 0,1-Mikrolitereinteilung
16. 5.4.5 Punkt 4
    Meßpipetten: 1, 4 und 5 ml
17. 5.5.5 Punkt 5
    Meßkolben: 10 und 50 ml
18. 5.6.5 Punkt 6
    Reagenzgläser mit etwa 20 ml Volumen mit Schraubstopfen, der an der Innenseite mit einem teflonbeschichteten Verschlußplättchen versehen ist
19. 5.7.5 Punkt 7
    Zentrifuge
20. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
21. 6.1.6 Punkt eins
    Empfohlene gaschromatographische Bedingungen
22. 6.1.1.6 Punkt eins Punkt eins
    Säulentyp: Glas

    Länge: 150 cm

    Durchmesser innen: 4 mm

    Durchmesser außen: 6 mm
23. 6.1.2.6 Punkt eins Punkt 2
    Säulenfüllmaterial: Poropak Q oder Chromosorb 101 – 80 bis 100 mesh oder gleichwertiges Material (4.1).
24. 6.1.3.6 Punkt eins Punkt 3
    Detektor: Flammenionisationsdetektor, dessen Empfindlichkeit so einzustellen ist, daß bei Injektion von 3 l der Lösung (4.7) die Höhe des Acetonitril-Peaks etwa ¾ der Gesamtskala abdeckt.
25. 6.1.4.6 Punkt eins Punkt 4
    Gase:

    Trägergas: Stickstoff – 65 ml pro min.

    Hilfsgase: Luft oder Sauerstoff; der Gasdurchsatz für den Flammenionisationsdetektor ist so einzustellen, daß der Luft- oder Sauerstoffdurchsatz 5- bis 10mal höher als der Wasserstoffdurchsatz ist.

    Wasserstoff.
26. 6.1.5.6 Punkt eins Punkt 5
    Temperatur:

    Injektionsblock: 210 °C

    Detektor: 210 °C

    Säule: 175 °C
27. 6.1.6.6 Punkt eins Punkt 6
    Schreiber:

    Papiervorschub etwa 100 cm pro Stunde.
28. 6.2.6 Punkt 2
    Probenvorbereitung

    Die Probe für die Analyse wird einer noch nicht geöffneten Tube entnommen. Ein Drittel des Tubeninhalts ist zu verwerfen. Danach wird die Tube verschlossen, der Inhalt gründlich durchgemischt und die Analysenprobe entnommen.
29. 6.3.6 Punkt 3
    Quantitative Bestimmung
30. 6.3.1.6 Punkt 3 Punkt eins
    6 bis 7 g (M0) der nach (6.2) vorbereiteten Zahnpastenprobe werden auf 10 mg genau in ein Reagenzglas mit Schraubstopfen (5.6) eingewogen und einige Glasperlen beigegeben.
31. 6.3.2.6 Punkt 3 Punkt 2
    In das Reagenzglas werden 5,0 ml der Standardlösung (4.6), 4 ml Dimethylformamid (4.4) und 1 ml Methanol (4.5) einpipettiert, mit dem Schraubstopfen verschlossen und homogenisiert.
32. 6.3.3.6 Punkt 3 Punkt 3
    Das verschlossene Reagenzglas wird eine halbe Stunde mechanisch geschüttelt und dann etwa 15 Minuten bei einer Drehzahl, die eine saubere Trennung der Phasen erlaubt, zentrifugiert.

    Bemerkung: Gelegentlich kommt es vor, daß die flüssige Phase nach dem Zentrifugieren noch getrübt ist. Hier läßt sich eine Verbesserung erreichen indem man 1 bis 2 g Natriumchlorid zu der flüssigen Phase gibt und erneut zentrifugiert.
33. 6.3.4.6 Punkt 3 Punkt 4
    3 l dieser Lösung (6.3.3) werden unter den in (6.1) beschriebenen Bedingungen injiziert. Dieser Vorgang wird wiederholt. Bei Beachtung der oben beschriebenen Voraussetzungen gelten als Retentionszeiten folgende Richtwerte:

1. 6.3.5.6 Punkt 3 Punkt 5
   Bestimmung des relativen Ansprechfaktors

   Zur Bestimmung des relativen Ansprechfaktors werden 3 l der Lösung (4.7) injiziert. Dieser Vorgang ist zu wiederholen. Der relative Ansprechfaktor ist täglich zu bestimmen.
2. 7.Ziffer 7
   BERECHNUNG
3. 7.1.7 Punkt eins
   Berechnung des relativen Ansprechens
4. 7.1.1.7 Punkt eins Punkt eins
   Die Höhe und die Breite in halber Höhe des Acetonitril-Peaks und des Chloroform-Peaks ist zu messen und die Fläche der beiden Peaks mit der Formel Höhe x Breite (in halber Höhe) zu berechnen.
5. 7.1.2.7 Punkt eins Punkt 2
   Man bestimmt die Fläche der nach (6.3.5) erhaltenen Chromatogramme und berechnet den relativen Ansprechfaktor fs mit Hilfe folgender Formel:

1. 7.2.7 Punkt 2
   Berechnung des Chloroformgehalts
2. 7.2.1.7 Punkt 2 Punkt eins
   Berechnet wird die Fläche des Chloroform-Peaks und des Acetonitril-Peaks der gemäß (6.3.4) erhaltenen und nach (7.1.1) ausgewerteten Chromatogramme.
3. 7.2.2.7 Punkt 2 Punkt 2
   Der Gehalt der Zahnpasta an Chloroform wird nach der folgenden Formel berechnet:

1. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Bei einem Chloroformgehalt von 3% m/m darf der Unterschied zwischen den Ergebnissen zweier Parallelbestimmungen an derselben Probe nicht höher sein als 0,3%.

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(1) Siehe Norm ISO/DIS 5725.

Anlage 6 VI. BESTIMMUNG DES ZINKGEHALTSrömisch VI. BESTIMMUNG DES ZINKGEHALTS

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode beschreibt die Bestimmung von Zink, das als Chlorid, Sulfat bzw. Phenolsulfonat oder als Kombination mehrerer dieser Zinksalze in Kosmetika enthalten ist.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Der Zinkgehalt der Probe wird als Zink-2-methyl-8-oxychinolat gravimetrisch nach dem nachstehenden Verfahren bestimmt und als Massenprozent Zink angegeben.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Das gelöste Zinksalz wird in saurem Milieu als Zink-2-methyl-8-oxychinolat gefällt. Der Niederschlag wird abfiltriert, getrocknet und ausgewogen.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Ammoniak, konz. 25 %ig (m/m);

         d = 0,91

1. 4.2.4 Punkt 2
   Eisessig
2. 4.3.4 Punkt 3
   Ammoniumacetat
3. 4.4.4 Punkt 4
   2-Methyl-8-oxychinolin
4. 4.5.4 Punkt 5
   Ammoniaklösung: 6 %ig (m/v). Hierzu werden 240 g Ammoniak (4.1) in einen 1 000-ml-Meßkolben gegeben und mit destilliertem Wasser bis zur Marke aufgefüllt.
5. 4.6.4 Punkt 6
   Ammoniumacetatlösung; 0,2 molar: Hierzu werden 15,4 g Ammoniumacetat (4.3) in destilliertem Wasser gelöst, die Lösung in einen 1 000-ml-Meßkolben eingegeben, bis zur Marke mit destilliertem Wasser aufgefüllt und gemischt.
6. 4.7.4 Punkt 7
   2-Methyl-8-oxychinolin-Lösung: 5 g 2-Methyl-8-oxychinolin werden in 12 ml Eisessig in einem 1 000-ml-Meßkolben gelöst, bis zur Marke mit destilliertem Wasser aufgefüllt und gemischt.
7. 5.Ziffer 5
   GERÄTE
8. 5.1.5 Punkt eins
   Meßkolben: 100 und 1 000 ml
9. 5.2.5 Punkt 2
   Bechergläser: 400 ml
10. 5.3.5 Punkt 3
    Meßzylinder: 50 und 150 ml
11. 5.4.5 Punkt 4
    Meßpipetten: 10 ml
12. 5.5.5 Punkt 5
    Glasfiltertiegel G 4
13. 5.6.5 Punkt 6
    Saugflasche: 500 ml
14. 5.7.5 Punkt 7
    Wasserstrahlpumpe
15. 5.8.5 Punkt 8
    Thermometer: Skala 0 bis 100 °C
16. 5.9.5 Punkt 9
    Exsikkator mit geeignetem Trocknungsmittel mit Feuchtigkeitsindikator, z. B. Silikagel oder gleichwertiges
17. 5.10.5 Punkt 10
    Trockenschrank: eingestellt auf 150 2 °C
18. 5.11.5 Punkt 11
    pH-Indikatorpapier
19. 5.12.5 Punkt 12
    Heizplatte
20. 5.13.5 Punkt 13
    Filterpapier: Whatman Nr. 4 oder entsprechendes Fabrikat
21. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
22. 6.1.6 Punkt eins
    5 bis 10 g (M) der zu untersuchenden Probe, die etwa 50 bis 100 mg Zink enthalten, werden in ein 400-ml-Becherglas eingewogen, 50 ml destilliertes Wasser hinzugefügt und der Inhalt durchgemischt.
23. „6.1.1.6 Punkt eins Punkt eins
    Die Mischung wird erforderlichenfalls mit Hilfe einer Vakuumpumpe filtriert und das Filtrat gesammelt.
24. 6.1.2.6 Punkt eins Punkt 2
    Die Extraktion wird nach Zugabe von 50 ml destilliertem Wasser wiederholt. Nach dem Filtrieren werden die Filtrate vereint“.
25. 6.2.6 Punkt 2
    Für je 10 mg in der Lösung (6.1) enthaltenes Zink werden 2 ml der 2-Methyl-8-oxychinolinlösung (4.7) zugegeben und erneut durchgemischt.
26. 6.3.6 Punkt 3
    Nach dem Verdünnen mit 150 ml destilliertem Wasser wird die Lösung auf 60 °C erwärmt (5.12), dann werden unter Rühren 45 ml 0,2 molare Ammoniumacetatlösung (4.6) hinzugegeben.
27. 6.4.6 Punkt 4
    Der pH-Wert der Lösung wird durch Einrühren von Ammoniaklösung (4.5) auf 5,7 bis 5,9 eingestellt; er wird mit pH-Indikatorpapier (5.11) kontrolliert.
28. 6.5.6 Punkt 5
    Die Lösung wird 30 Minuten lang stehengelassen und danach mit einer Wasserstrahlpumpe durch eine zuvor bei 150 °C getrocknete und nach dem Abkühlen gewogene (M0) Fritte (G 4) filtriert. Anschließend wird der in der Fritte gesammelte Niederschlag mit insgesamt 150 ml etwa 95 °C heißem destilliertem Wasser gewaschen.
29. 6.6.6 Punkt 6
    Der Niederschlag wird in einem Trockenofen bei 150 °C eine Stunde lang getrocknet.
30. 6.7.6 Punkt 7
    Nach der Trockenzeit wird die Fritte mit dem Niederschlag aus dem Trockenofen genommen und in einen Exsikkator (5.9) gestellt; nach dem Abkühlen auf Zimmertemperatur wird deren Masse (M1) bestimmt.
31. 7.Ziffer 7
    BERECHNUNG

    Der Zinkgehalt der Probe wird in Massenprozenten (% m/m) nach folgender Formel berechnet:

1. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Bei einem Zinkgehalt von etwa 1 % (m/m) darf der Unterschied zwischen den Ergebnissen von 2 Parallelbestimmungen an der gleichen Probe 0,1% nicht überschreiten.

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(1) Siehe Norm ISO/DIS 5725.

Anlage 7 VII. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER PHENOLSULFONSÄURErömisch VII. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER PHENOLSULFONSÄURE

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode beschreibt die qualitative und quantitative Bestimmung der Phenolsulfonsäure in kosmetischen Erzeugnissen, z. B. in Aerosolen und Gesichtswässern.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Die nach dieser Vorschrift bestimmte Phenolsulfonsäure wird in Massenprozent als Zinkphenolsulfonsäure (wasserfreie Substanz) ausgedrückt, siehe Punkt 11.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Der zu analysierende Teil der Probe wird unter vermindertem Druck eingeengt, in Wasser gelöst und mit Chloroform extrahiert. Die Bestimmung der Phenolsulfonsäure erfolgt bromo-jodometrisch in einem aliquoten Teil der gereinigten und filtrierten wässerigen Lösung.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Salzsäure, konz. 36 %ig

         d = 1,18

1. 4.2.4 Punkt 2
   Chloroform
2. 4.3.4 Punkt 3
   n-Butanol
3. 4.4.4 Punkt 4
   Eisessig
4. 4.5.4 Punkt 5
   Kaliumjodid
5. 4.6.4 Punkt 6
   Kaliumbromid
6. 4.7.4 Punkt 7
   Natriumcarbonat
7. 4.8.4 Punkt 8
   Sulfanilsäure
8. 4.9.4 Punkt 9
   Natriumnitrit
9. 4.10.4 Punkt 10
   Kaliumbromatlösung: 0,1 N
10. 4.11.4 Punkt 11
    Natriumthiosulfatlösung: 0,1 N
11. 4.12.4 Punkt 12
    Stärkelösung: 1 %ig (m/v) in Wasser
12. 4.13.4 Punkt 13
    Natriumcarbonatlösung: 2 %ig (m/v) in Wasser
13. 4.14.4 Punkt 14
    Natriumnitritlösung: 4,5 %ig (m/v) in Wasser
14. 4.15.4 Punkt 15
    Dithizonlösung: 0,05 %ig (m/v) in Chloroform
15. 4.16.4 Punkt 16
    Fließmittel: n-Butanol-Eisessig-Wasser (4:1:5), v); nach dem Mischen im Scheidetrichter wird die untere Phase verworfen.
16. 4.17.4 Punkt 17
    Reagenz nach Pauly für die Dünnschichtchromatographie: 4,5 g Sulfanilsäure (4.8) werden in 45 ml konzentrierter Salzsäure (4.1) unter Erwärmen gelöst und die Lösung mit Wasser auf 500 ml verdünnt. 10 ml der Lösung werden in Eiswasser gekühlt und unter Rühren 10 ml klare Natriumnitritlösung (4.14) zugesetzt. Danach läßt man die Lösung ca. 15 Minuten bei 0 °C stehen – die Lösung ist bei dieser Temperatur 1 bis 3 Tage stabil; kurz vor dem Besprühen (7.5) werden 20 ml Natriumcarbonatlösung (4.13) hinzugegeben.
17. 4.18.4 Punkt 18
    Zellulosebeschichtete Fertigplatten für die Dünnschichtchromatographie; Format 20 x 20 cm, Dicke der Sorbtionsschicht 0,25 mm.
18. 5.Ziffer 5
    GERÄTE
19. 5.1.5 Punkt eins
    Rundkolben mit Schliff: 100 ml
20. 5.2.5 Punkt 2
    Scheidetrichter: 100 ml
21. 5.3.5 Punkt 3
    Erlenmeyerkolben mit Schliff: 250 ml
22. 5.4.5 Punkt 4
    Bürette: 25 ml
23. 5.5.5 Punkt 5
    Vollpipetten: 1, 2 und 10 ml
24. 5.6.5 Punkt 6
    Meßpipette: 5 ml
25. 5.7.5 Punkt 7
    Injektionsspritze: 10 l mit 0,1 Mikroliterskala
26. 5.8.5 Punkt 8
    Thermometer: Skala von 0 bis 100 °C
27. 5.9.5 Punkt 9
    Wasserbad mit Heizung
28. 5.10.5 Punkt 10
    Trockenofen: gut ventiliert und auf 80 °C eingestellt
29. 5.11.5 Punkt 11
    Übliche Ausrüstung für die Dünnschichtchromatographie
30. 6.Ziffer 6
    PROBENVORBEREITUNG

    Für die im folgenden beschriebene qualitative und quantitative Bestimmung der Phenolsulfonsäure in Aerosolen kann der Rückstand des Sprühdoseninhalts verwendet werden, der durch Abdestillation der flüchtigen Lösungs- und Treibmittel unter normalem Druck erhalten wird.
31. 7.Ziffer 7
    IDENTIFIZIERUNG
32. 7.1.7 Punkt eins
    Auf der Startlinie – 1 cm über der unteren Kante der Dünnschichtplatte (4.18) – werden auf sechs Punkte mit einer Injektionsspritze (5.7) jeweils 5 l des Rückstandes (6) oder der Probe aufgetragen.
33. 7.2.7 Punkt 2
    Die Platte wird in eine Entwicklungskammer mit dem Fließmittel (4.16) eingesetzt und so lange entwickelt, bis die Fließmittelfront 15 cm über der Startlinie erreicht hat.
34. 7.3.7 Punkt 3
    Dann wird die Platte aus der Entwicklungskammer genommen, bei 80 °C getrocknet, bis keine Essigsäuredämpfe mehr wahrnehmbar sind, anschließend mit Natriumcarbonatlösung (4.13) besprüht und an der Luft getrocknet.
35. 7.4.7 Punkt 4
    Die eine Hälfte der Platte wird mit einer Glasplatte abgedeckt und der nicht abgedeckte Teil mit 0,05%iger Dithizonlösung (4.15) besprüht. Zink-Ionen werden durch Bildung rotvioletter Flecke angezeigt.
36. 7.5.7 Punkt 5
    Dann wird die bereits besprühte Hälfte mit Pauly-Reagens (4.17) besprüht. Die p-Phenolsulfonsäure (Rf-Wert etwa 0,26) wird als gelb-brauner, die m-Phenolsulfonsäure (Rf-Wert etwa 0,45) als gelber Fleck im Chromatogramm sichtbar.
37. 8.Ziffer 8
    QUANTITATIVE BESTIMMUNG
38. 8.1.8 Punkt eins
    10 g der Probe oder des Rückstandes (6) werden in einen 100-ml-Rundkolben eingewogen und mittels eines Rotationsverdampfers im Vakuum im Wasserbad von 40 °C annähernd zur Trocknung eingeengt.
39. 8.2.8 Punkt 2
    Danach werden 10,0 ml (V1) Wasser in den Kolben einpipettiert und der Abdampfrückstand (8.1) in der Wärme gelöst.
40. 8.3.8 Punkt 3
    Die Lösung wird in einen Scheidetrichter (5.2) quantitativ überführt und die wässerige Lösung zweimal mit jeweils 20 ml Chloroform (4.2) extrahiert; die Chloroformphase wird nach jeder Extraktion verworfen.
41. 8.4.8 Punkt 4
    Die wässerige Lösung wird durch einen Papierfilter filtriert und je nach dem erwarteten Gehalt an Phenolsulfonsäure 1,0 oder 2,0 ml (V2) des Filtrats in einen 250-ml-Erlenmeyerkolben (5.3) eingegeben und mit destilliertem Wasser auf 75 ml verdünnt.
42. 8.5.8 Punkt 5
    Anschließend werden 2,5 ml 36%ige Salzsäure (4.1) sowie 2,5 g Kaliumbromid (4.6) zugefügt, durchgemischt und die Lösung im Wasserbad auf 50 °C erwärmt.
43. 8.6.8 Punkt 6
    Aus einer Bürette wird so viel 0,1 N Kaliumbromatlösung (4.10) hinzugefügt, bis die Farbe der 50 °C warmen Lösung nach gelb umschlägt.
44. 8.7.8 Punkt 7
    Nach dem Zusatz weiterer 3,0 ml Kaliumbromatlösung (4.10) wird der Kolben verschlossen und 10 Minuten in ein Wasserbad (50 °C) eingestellt. Sollte nach 10 Minuten die Gelbfärbung der Lösung verschwunden sein, werden weitere 2,0 ml Kaliumbromatlösung (4.10) in den Kolben gegeben, dieser erneut mit dem passenden Stopfen verschlossen und weitere 10 Minuten in das Wasserbad eingestellt. Die Gesamtmenge (a) der zugegebenen Kaliumbromatlösung ist festzuhalten.
45. 8.8.8 Punkt 8
    Die Lösung wird auf Zimmertemperatur abgekühlt, 2 g Kaliumjodid (4.5) zugegeben und durchgemischt.
46. 8.9.8 Punkt 9
    Das gebildete Jod wird mit 0,1 N Natriumthiosulfatlösung (4.11) titriert. Zum Abschluß der Titration werden einige Tropfen Stärkelösung (4.12) als Indikator zugesetzt. Die verbrauchte Menge Natriumthiosulfat (b) ist festzuhalten.
47. 9.Ziffer 9
    BERECHNUNG

    Der Gehalt an Zinkphenolsulfonat der Probe oder des Rückstands (6) wird in Massenprozent (% m/m) mittels folgender Formel berechnet:

1. 10.Ziffer 10
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Bei einem Gehalt von etwa 5% Zinkphenolsulfonat darf der Unterschied zwischen den Ergebnissen von 2 Parallelbestimmungen an der gleichen Probe nicht mehr als 0,5% relativ betragen.
2. 11.Ziffer 11
   INTERPRETATION DER MESSERGEBNISSE

   Nach der Richtlinie für kosmetische Mittel dürfen Gesichtswässer und Deodorantien höchstens 6% (m/m) Zinkphenolsulfonat enthalten. Aufgrund dieser Vorschrift muß neben dem Gehalt an Phenolsulfonsäure auch der Gehalt an Zink bestimmt werden. Multipliziert man den berechneten (9) Gehalt an Zinkphenolsulfonat mit dem Faktor 0,1588, dann wird der Zinkgehalt in % (m/m) erhalten, der aufgrund des gemessenen Gehalts an Phenolsulfonsäure mindestens in dem Erzeugnis enthalten sein muß. Der tatsächliche, gravimetrisch bestimmte Zinkgehalt – siehe die entsprechende Vorschrift kann jedoch höher sein, da zur Herstellung kosmetischer Mittel auch Zinkchlorid und/oder Zinksulfat verwendet werden darf.

_______________

(1) Siehe Norm ISO/DIS 5725.

Anlage 8 I. NACHWEIS VON OXIDATIONSMITTELN UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON WASSERSTOFFPEROXID IN HAARPFLEGEMITTELNrömisch eins. NACHWEIS VON OXIDATIONSMITTELN UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON WASSERSTOFFPEROXID IN HAARPFLEGEMITTELN

ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

Die jodometrische Bestimmung von Wasserstoffperoxid in Kosmetika ist nur bei Abwesenheit anderer Oxidationsmittel, die mit Jodid Jod bilden, möglich. Vor einer jodometrischen Bestimmung von Wasserstoffperoxid müssen daher etwaige andere anwesende Oxidationsmittel erkannt und nachgewiesen werden. Dieser Nachweis gliedert sich in zwei Teile; der erste Teil erfaßt die Persulfate, Bromate sowie Wasserstoffperoxid und der zweite Teil Bariumperoxid.

A. NACHWEIS VON PERSULFATEN, BROMATEN UND WASSERSTOFFPEROXID

1. 1.Ziffer eins
   PRINZIP

   Natrium-, Kalium- und Ammoniumpersulfat; Kalium- und Natriumbromat sowie Wasserstoffperoxid – alles Stoffe, die sich nicht vom Bariumperoxid ableiten – werden mit Hilfe der absteigenden Papierchromatographie unter Verwendung von zwei Fließmitteln nachgewiesen.
2. 2.Ziffer 2
   REAGENZIEN

   Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
3. 2.1.2 Punkt eins
   Referenzlösungen von 0,5 % (m/v) in Wasser:
4. 2.1.1.2 Punkt eins Punkt eins
   Natriumpersulfat
5. 2.1.2.2 Punkt eins Punkt 2
   Kaliumpersulfat
6. 2.1.3.2 Punkt eins Punkt 3
   Ammoniumpersulfat
7. 2.1.4.2 Punkt eins Punkt 4
   Kaliumbromat
8. 2.1.5.2 Punkt eins Punkt 5
   Natriumbromat
9. 2.1.6.2 Punkt eins Punkt 6
   Wasserstoffperoxid
10. 2.2.2 Punkt 2
    Fließmittel A: 80 %iges Äthanol (v/v)
11. 2.3.2 Punkt 3
    Fließmittel B: Benzol – Methanol – Isoamylalkohol – Wasser (34 + 38 + 18 + 10) (v/v/v/v)
12. 2.4.2 Punkt 4
    Sprühmittel A: 10 %ige Kaliumjodidlösung (m/v) in Wasser
13. 2.5.2 Punkt 5
    Sprühmittel B: 1 %ige Stärkelösung (m/v) in Wasser
14. 2.6.2 Punkt 6
    Sprühmittel C: 10 %ige Salzsäure (m/m)
15. 2.7.2 Punkt 7
    Salzsäure: 4 N
16. 3.Ziffer 3
    GERÄTE UND HILFSMITTEL
17. 3.1.3 Punkt eins
    Papier für die Chromatographie (Whatman-Papier Nr. 3 oder Nr. 4 oder gleichwertiges Papier)
18. 3.2.3 Punkt 2
    Mikropipette 1 l
19. 3.3.3 Punkt 3
    Meßkolben 100 ml
20. 3.4.3 Punkt 4
    Faltenfilter
21. 3.5.3 Punkt 5
    Ausrüstung zur Durchführung der absteigenden Papierchromatographie
22. 4.Ziffer 4
    VORBEREITUNG DER PROBEN
23. 4.1.4 Punkt eins
    Wasserlösliche Erzeugnisse

    Von jedem Muster sind zwei Lösungen herzustellen, von denen bei der ersten 1 und bei der zweiten 5 Gramm des Erzeugnisses in 100 ml Wasser aufgelöst werden. Von jeder dieser Lösungen ist 1 Mikroliter für die Durchführung der unter Punkt 5 beschriebenen Papierchromatographie zu benutzen.
24. 4.2.4 Punkt 2
    Nicht vollkommen wasserlösliche Erzeugnisse
25. 4.2.1.4 Punkt 2 Punkt eins
    1 bzw. 5 Gramm der Probe werden gewogen und in 50 ml Wasser suspendiert, beide Suspensionen mit Wasser auf 100 ml auffüllen und gut durchschütteln. Beide Suspensionen werden filtriert und von jedem Filtrat ein Mikroliter zur Durchführung der unter 5 beschriebenen Chromatographie verwendet.
26. 4.2.2.4 Punkt 2 Punkt 2
    Es sind erneut von jeder Probe zwei Suspensionen anzufertigen, indem 1 bzw. 5 Gramm in 50 ml Wasser suspendiert, mit verdünnter Salzsäure (2.7) angesäuert, mit Wasser auf 100 ml aufgefüllt und durchmischt werden. Die Suspensionen werden filtriert und ein Mikroliter von beiden Filtraten zur Durchführung der unter 5 beschriebenen Papierchromatographie verwendet.
27. 4.3.4 Punkt 3
    Cremes

    Von jedem Erzeugnis werden 5 g und 20 g in je 100 ml Wasser suspendiert und die Suspensionen zur Durchführung der unter 5 beschriebenen Papierchromatographie verwendet.
28. 5.Ziffer 5
    ARBEITSWEISE
29. 5.1.5 Punkt eins
    Zwei Chromatographiegefäße zur Durchführung der absteigenden Papierchromatographie mit einer geeigneten Menge des Fließmittels A (2.2) und B (2.3) füllen. Die Chromatographiegefäße werden wenigstens 24 Stunden lang mit den Dämpfen der Fließmittel gesättigt.
30. 5.2.5 Punkt 2
    Auf einen 40 cm langen und 20 cm breiten Papierstreifen Whatman-Papier Nr. 3 (3.1) dieser kann auch ein anderes geeignetes Format haben – auf je einen Startpunkt 1 l der gemäß 4 und 2.1 zubereiteten Probe- und Referenzlösung auftragen und das Lösungsmittel an der Luft verdampfen lassen.
31. 5.3.5 Punkt 3
    Das Chromatographiepapier (5.2) in das mit dem Fließmittel A (5.1) gefüllte Chromatographiegefäß hängen und chromatographieren, bis sich die Fließmittelfront in einem Abstand von 35 cm von der Startlinie befindet. Die hierzu erforderliche Laufzeit beträgt ungefähr 15 Stunden.
32. 5.4.5 Punkt 4
    Die Vorgänge gemäß 5.2 und 5.3 mit Whatman-Papier Nr. 4 (oder gleichwertiges Papier) (3.1) und Fließmittel B wiederholen. Chromatographieren, bis die Fließmittelfront 35 cm von der Startlinie beträgt. Die hierzu erforderliche Zeit beträgt ungefähr 5 Stunden.
33. 5.5.5 Punkt 5
    Nach Entwicklung werden die Papierstreifen aus den Chromatographiegefäßen herausgenommen und an der Luft getrocknet.
34. 5.6.5 Punkt 6
    Die Verbindungen werden auf dem Chromatogramm durch Besprühen mit Dedektionsmitteln auf dem Papierstreifen sichtbar gemacht. Dabei ist wie folgt vorzugehen:
35. 5.6.1.5 Punkt 6 Punkt eins
    Zunächst mit Sprühmittel A (2.4) und kurz danach mit Sprühmittel B (2.5) besprühen. Zunächst erscheinen die Flecke der Persulfate und danach die des Wasserstoffperoxids auf dem Chromatogramm. Die Flecke sind mit Bleistift zu markieren.
36. 5.6.2.5 Punkt 6 Punkt 2
    Mit Sprühmittel C (2.6) werden die nach 5.6.1 erhaltenen Chromatogramme besprüht. Vorhandene Bromate werden auf dem Chromatogramm als grau-blaue Flecke sichtbar.
37. 5.7.5 Punkt 7
    Rf-Werte der Vergleichssubstanzen (2.1) unter den oben beschriebenen Bedingungen für die Fließmittel A (2.2) und B (2.3):

B. NACHWEIS VON BARIUMPEROXID

1. 1.Ziffer eins
   PRINZIP

   Bariumperoxid wird wie folgt nachgewiesen: Papierchromatographisch als Wasserstoffperoxid nach dem Ansäuern der Probe (A.4.2);

   • –Strichaufzählung
     sofern keine Persulfate vorhanden sind (A), durch Hinzufügen von verdünnter Schwefelsäure in einen Teil der sauren Probelösung (B.4.1). Es entsteht ein weißer Bariumsulfatniederschlag. Barium-Ionen werden in der Probelösung (4.1) papierchromatographisch nach der unten beschriebenen Methode (5) nochmal nachgewiesen;
   • –Strichaufzählung
     falls Bariumperoxid und Persulfate gleichzeitig vorhanden sind (B.4.2), ist der Rückstand der Lösung alkalisch aufzuschließen und in HCl zu lösen. Der Nachweis von Barium-Ionen (B.4.2.3) erfolgt sowohl papierchromatographisch als auch durch Fällung als Bariumsulfat.
2. 2.Ziffer 2
   REAGENZIEN
3. 2.1.2 Punkt eins
   Methanol
4. 2.2.2 Punkt 2
   36 %ige (m/m) konzentrierte Salzsäure
5. 2.3.2 Punkt 3
   Salzsäure 6 N
6. 2.4.2 Punkt 4
   Schwefelsäure 4 N
7. 2.5.2 Punkt 5
   Dinatriumrhodizonat
8. 2.6.2 Punkt 6
   Bariumchlorid (BaCl2 2H2O)
9. 2.7.2 Punkt 7
   Natriumcarbonat, wasserfrei
10. 2.8.2 Punkt 8
    1 %ige Bariumchloridlösung in Wasser (m/v)
11. 2.9.2 Punkt 9
    Fließmittel: Methanol/36 %ige Salzsäure/Wasser (80+10+10) (v/v/v/)
12. 2.10.2 Punkt 10
    Sprühmittel: 0,1 %ige Dinatriumrhodizonatlösung in Wasser (m/v); die Lösung ist kurz vor Gebrauch frisch herzustellen.
13. 3.Ziffer 3
    GERÄTE UND HILFSMITTEL
14. 3.1.3 Punkt eins
    Mikropipette 5 l
15. 3.2.3 Punkt 2
    Platintiegel
16. 3.3.3 Punkt 3
    Meßkolben 100 ml
17. 3.4.3 Punkt 4
    Chromatographiepapier (Schleicher und Schüll 2043b, oder gleichwertiges). Zur Vorbereitung ist das Papier eine Nacht lang absteigend mit dem Fließmittel (B.2.9) zu chromatographieren (A.3.5) und danach zu trocknen.
18. 3.5.3 Punkt 5
    Faltenfilter
19. 3.6.3 Punkt 6
    Ausrüstung für die aufsteigende Papierchromatographie
20. 4.Ziffer 4
    VORBEREITUNG DER PROBEN
21. 4.1.4 Punkt eins
    Erzeugnisse, in denen keine Persulfate enthalten sind
22. 4.1.1.4 Punkt eins Punkt eins
    2 Gramm des Erzeugnisses werden in 50 ml Wasser suspendiert (auflösen). Der pH-Wert der Lösung wird mit Salzsäure auf etwa 1 eingestellt (B.2.3).
23. 4.1.2.4 Punkt eins Punkt 2
    Die Lösung (Suspension) wird mit Wasser in einen 100-ml-Meßkolben überführt, mit Wasser bis zur Marke aufgefüllt und gemischt. Die Lösung wird, wie unter 5 beschrieben, papierchromatographisch untersucht.
24. 4.2.4 Punkt 2
    Erzeugnisse, die Persulfate enthalten
25. 4.2.1.4 Punkt 2 Punkt eins
    2 Gramm des Erzeugnisses werden in 100 ml Wasser suspendiert (auflösen) und filtriert.
26. 4.2.2.4 Punkt 2 Punkt 2
    In einem Platintiegel (B.3.2) wird dem getrockneten Rückstand das Sieben- bis Zehnfache seines Gewichts an Natriumcarbonat hinzugefügt (B.2.7), durchgemischt und so lange erhitzt, bis eine Schmelze entsteht (30 min.).
27. 4.2.3.4 Punkt 2 Punkt 3
    Die auf Raumtemperatur abgekühlte Schmelze wird in 50 ml Wasser suspendiert und filtriert (B.3.5).
28. 4.2.4.4 Punkt 2 Punkt 4
    Der Schmelzrückstand wird in 6 N Salzsäure (B.2.3) aufgelöst und mit Wasser auf 100 ml aufgefüllt. Diese Lösung wird für die nachstehend beschriebene papierchromatographische Analyse und für die Identifizierung der Bariumionen durch Fällung als Bariumsulfat verwendet.
29. 5.Ziffer 5
    ARBEITSWEISE
30. 5.1.5 Punkt eins
    In ein Chromatographiegefäß für aufsteigende Papierchromatographie wird eine geeignete Menge Fließmittel (B.2.9) gegeben und das Gefäß wenigstens 15 Stunden lang mit den Dämpfen des Fließmittels gesättigt.
31. 5.2.5 Punkt 2
    Auf ein – in der in Punkt (B.3.4) beschriebenen Weise vorbehandeltes – Stück Chromatographiepapier werden auf drei Startpunkte jeweils 5 l der unter (B.4.1.2) und (B.4.2.4) hergestellten Lösungen und der Referenzlösung (B.2.8) gegeben.
32. 5.3.5 Punkt 3
    Das Lösungsmittel an der Luft verdampfen lassen. Es wird aufsteigend chromatographiert, bis die Fließmittelfront 30 cm erreicht hat.
33. 5.4.5 Punkt 4
    Das Chromatographiepapier ist aus der Chromatographierschale zu nehmen und an der Luft zu trocknen.
34. 5.5.5 Punkt 5
    Die Flecke im Chromatogramm durch Aufsprühen des Sprühmittels (B.2.10) auf das Chromatogramm sichtbar machen. Ist Barium vorhanden, so entstehen rote Flecke mit einen Rf-Wert von ungefähr 0,10.

C. DIE BESTIMMUNG VON WASSERSTOFFPEROXID

1. 1.Ziffer eins
   PRINZIP

   Die jodometrische Bestimmung von Wasserstoffperoxid verläuft nach der folgenden Reaktion:

1. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Der auf nachstehende Weise gemessene Wasserstoffperoxidgehalt wird in Massen-Prozent (% m/m) der Ware ausgedrückt.
2. 3.Ziffer 3
   REAGENZIEN Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
3. 3.1.3 Punkt eins
   Schwefelsäure 2 N
4. 3.2.3 Punkt 2
   Kaliumjodid
5. 3.3.3 Punkt 3
   Ammoniummolybdat
6. 3.4.3 Punkt 4
   Natriumthiosulfatlösung 0,1 N
7. 3.5.3 Punkt 5
   10 %ige Kaliumjodidlösung (m/v). Die Lösung kurz vor Gebrauch frisch herstellen.
8. 3.6.3 Punkt 6
   20 %ige Ammoniummolybdatlösung (m/v)
9. 3.7.3 Punkt 7
   1 %ige Stärkelösung (m/v)
10. 4.Ziffer 4
    GERÄTE UND HILFSMITTEL
11. 4.1.4 Punkt eins
    Bechergläser 100 ml
12. 4.2.4 Punkt 2
    Bürette 50 ml
13. 4.3.4 Punkt 3
    Meßkolben 250 ml
14. 4.4.4 Punkt 4
    Meßzylinder 25 und 100 ml
15. 4.5.4 Punkt 5
    geeichte Pipette 10 ml
16. 4.6.4 Punkt 6
    Erlenmeyerkolben 250 ml
17. 5.Ziffer 5
    ARBEITSWEISE
18. 5.1.5 Punkt eins
    10 Gramm (m) des Erzeugnisses, das ungefähr 0,6 Gramm Wasserstoffperoxid enthält, werden in ein 100-ml-Becherglas eingewogen, mit Wasser in einen 250-ml Meßkolben überspült, bis zum Eichstrich mit Wasser aufgefüllt und gemischt.
19. 5.2.5 Punkt 2
    Von der Probelösung (5.1) werden 10 ml in einen 250-ml-Erlenmeyerkolben (4.6) pipettiert und nacheinander 100 ml Schwefelsäure 2 N (3.1), 20 ml Kaliumjodidlösung (3.5) sowie drei Tropfen Ammoniummolybdatlösung (3.6) hinzugefügt.
20. 5.3.5 Punkt 3
    Das gebildete Jod wird unmittelbar mit 0,1 N (3.4) Natriumthiosulfatlösung titriert. Kurz vor Erreichen des Äquivalenzpunktes sind einige Milliliter Stärkelösung als Indikator hinzuzufügen. Den in ml (V ml) ausgedrückten Verbrauch an 0,1 N Natriumthiosulfatlösung notieren.Das gebildete Jod wird unmittelbar mit 0,1 N (3.4) Natriumthiosulfatlösung titriert. Kurz vor Erreichen des Äquivalenzpunktes sind einige Milliliter Stärkelösung als Indikator hinzuzufügen. Den in ml (römisch fünf ml) ausgedrückten Verbrauch an 0,1 N Natriumthiosulfatlösung notieren.
21. 5.4.5 Punkt 4
    In der Weise wie unter 5.2 und 5.3 angegeben, ist eine Blindbestimmung durchzuführen, bei der anstelle der 10 ml Probelösung 10 ml Wasser verwendet werden. Den Verbrauch an 0,1 N Natriumthiosulfatlösung bei der Blindbestimmung (Vo ml) notieren.In der Weise wie unter 5.2 und 5.3 angegeben, ist eine Blindbestimmung durchzuführen, bei der anstelle der 10 ml Probelösung 10 ml Wasser verwendet werden. Den Verbrauch an 0,1 N Natriumthiosulfatlösung bei der Blindbestimmung (römisch fünf o ml) notieren.
22. 6.Ziffer 6
    BERECHNUNG Der Gehalt an Wasserstoffperoxid der Ware in Gewichts-Prozent (% m/m) wird nach folgender Formel berechnet:

1. 7.Ziffer 7
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Unter den oben beschriebenen Umständen beträgt die Standardabweichung der Meßergebnisse bei einer Probe, die ungefähr 6 % (m/m) Wasserstoffperoxid enthält, höchstens 0,2 %.

_____________

(1) Siehe Norm ISO 5725.

Anlage 9 II. NACHWEIS UND HALBQUANTITATIVE BESTIMMUNG VON OXIDIERENDEN FARBSTOFFEN IN HAARFÄRBEMITTELNrömisch II. NACHWEIS UND HALBQUANTITATIVE BESTIMMUNG VON OXIDIERENDEN FARBSTOFFEN IN HAARFÄRBEMITTELN

1. 1.Ziffer eins
   ZWECK UND ANWENDUNGSBEREICH

   Nach dieser Methode lassen sich nachstehend aufgeführte Substanzen in cremeförmigen und flüssigen Haarfärbemitteln nachweisen und halbquantitativ bestimmen:

1. 2.Ziffer 2
   PRINZIP

   Die oxidierenden Farbstoffe werden den cremeförmigen oder flüssigen Färbemitteln bei einem pH-Wert von 10 mit Hilfe von 96 %igem Äthanol entzogen und dünnschichtchromatographisch (eindimensional (5) und/oder zweidimensional (6)) identifiziert.

   Zur halbquantitativen Bestimmung der Substanzen vergleicht man das chromatographische Bild der Proben unter Anwendung von vier Entwicklungssystemen mit denjenigen der Lösungen der chromatographisch bestimmten Vergleichserzeugnisse.
2. 3.Ziffer 3
   REAGENZIEN

   Es sind ausschließlich analysenreine Reagenzien zu verwenden.
3. 3.1.3 Punkt eins
   absolutes Äthanol
4. 3.2.3 Punkt 2
   Aceton
5. 3.3.3 Punkt 3
   Äthanol 96° (v/v)
6. 3.4.3 Punkt 4
   25 %iges Ammoniak

         (d = 0,91)

1. 3.5.3 Punkt 5
   L(+)-Ascorbinsäure
2. 3.6.3 Punkt 6
   Chloroform
3. 3.7.3 Punkt 7
   Cyclohexan
4. 3.8.3 Punkt 8
   technischer Stickstoff
5. 3.9.3 Punkt 9
   Toluol
6. 3.10.3 Punkt 10
   Benzol
7. 3.11.3 Punkt 11
   primäres Butanol
8. 3.12.3 Punkt 12
   sekundäres Butanol
9. 3.13.3 Punkt 13
   50 %ige unterphosphorige Säure
10. 3.14.3 Punkt 14
    Diazoreagenzien: hier können verwendet werden

    • –Strichaufzählung
      4-Nitro-1-benzoldiazon, versalzen und stabilisiert durch (beispielsweise) Chlorbenzolsulfonat-Ion (rouge 2 JN von Francolor oder ähnliches),
    • –Strichaufzählung
      2-Chloro-4nitro-1-benzoldiazon, versalzen und stabilisiert durch (beispielsweise) Naphthalinbenzoat-Ion (NNCD Reagens – Nr. 74150 von Fluka oder ähnliches).
11. 3.15.3 Punkt 15
    Silbernitrat
12. 3.16.3 Punkt 16
    p-Dimethylaminobenzaldehyd
13. 3.17.3 Punkt 17
    2-5-Dimethylphenol
14. 3.18.3 Punkt 18
    Ferrochlorid 6 H2O
15. 3.19.3 Punkt 19
    10 %ige Salzsäure
16. 3.20.3 Punkt 20
    Vergleichssubstanzen

    Als Vergleichssubstanzen dienen die im Abschnitt 1 „Zweck und Anwendungsbereich“ aufgeführten Stoffe. Amino-Verbindungen sind ausschließlich als Mono- oder Bi-Chlorhydrate oder in basischer Form zu verwenden.
17. 3.21.3 Punkt 21
    Vergleichslösungen (0,5 % m/v)

    Von jeder der in 3.20 genannten Vergleichssubstanzen wird eine 0,5 %ige (m/v) Lösung hergestellt.

    50 mg 1 mg der Vergleichssubstanz werden in einen 10-ml-Meßkolben eingewogen.

    5 ml 96 %iges Äthanol hinzugeben (3.3).

    250 mg Ascorbinsäure hinzugeben (3.5).

    Die Mischung mit Hilfe einer Ammoniaklösung (3.4) auf einen pH-Wert von 10 bringen.

    Mit 96 %igem Äthanol auf 10 ml auffüllen und mischen.

    Die Lösungen können eine Woche lang an einem kühlen, lichtgeschützten Ort aufbewahrt werden.

    Bei der Zugabe der Ascorbinsäure und des Ammoniaks kann sich in bestimmten Fällen ein Niederschlag bilden. In diesem Fall empfiehlt sich vor der Probenahme eine Dekantierung.
18. 3.22.3 Punkt 22
    Laufmittel
19. 3.22.1.3 Punkt 22 Punkt eins
    Aceton – Chloroform – Toluol: 35-25-40 (v/v/v)
20. 3.22.2.3 Punkt 22 Punkt 2
    Chloroform – Cyclohexan – Absolutes Äthanol – 25 %iges Ammoniak: 80-10-10-1 (v/v/v/v)
21. 3.22.33 Punkt 22 Punkt 3
    Benzol – Sekundäres Butanol – Wasser: 50-25-25 (v/v/v). Die Mischung gut schütteln und nach Dekantierung bei Raumtemperatur (20 – 25 °C) die oberste Phase abnehmen.
22. 3.22.4.3 Punkt 22 Punkt 4
    Primäres Butanol – Chloroform und Reagens M: 7-70-23 (v/v/v). Bei 20 bis 25 °C sorgfältig dekantieren und die untere Phase verwenden.

    Vorbereitung des Reagens M

1. 3.23.3 Punkt 23
   Nachweismittel
2. 3.23.1.3 Punkt 23 Punkt eins
   Diazoreagens

   Eine 5 %ige wäßrige Lösung (m/v) des Reagens (3.14) herstellen. Diese Lösung muß unmittelbar vor ihrer Verwendung hergestellt werden.
3. 3.23.2.3 Punkt 23 Punkt 2
   Reagens nach Ehrlich

   2 g p-Dimethylaminobenzaldehyd (3.16) in 100 ml 10 %iger wäßriger Salzsäure (m/v) auflösen (3.19).
4. 3.23.3.3 Punkt 23 Punkt 3
   2-5-Dimethylphenol-Ferrochlorid 6 H2O

   Lösung 1: 1 g Dimethylphenol (3.17) in 100 ml 96 %igem Äthanol auflösen (3.3).

   Lösung 2: 4 g Ferrochlorid 6 H2O (3.18) in 100 ml 96 %igem Äthanol auflösen (3.3).

   Bei Durchführung des Nachweises die beiden Lösungen einzeln aufsprühen, und zwar zunächst Lösung 1 und dann Lösung 2.
5. 3.23.4.3 Punkt 23 Punkt 4
   Ammoniakalisches Silbernitrat

   Einer 5 %igen wäßrigen Lösung (m/v) von Silbernitrat (3.15) 25 %iges Ammoniak (3.4) zusetzen, bis sich der Niederschlag auflöst.

   Dieses Reagens ist unmittelbar vor seiner Verwendung herzustellen. Nicht aufbewahren!
6. 4.Ziffer 4
   GERÄTE
7. 4.1.4 Punkt eins
   Laboratoriumsausrüstung für Dünnschichtchromatographie
8. 4.1.1.4 Punkt eins Punkt eins
   Kunststoff- oder Glasschale, in der die chromatographische Platte während der Absitzung und bis zur Ausentwicklung unter Stickstoff gehalten werden kann. Diese Vorsichtsmaßnahme ist wegen der starken Oxidierbarkeit bestimmter Farbstoffe notwendig.
9. 4.1.2.4 Punkt eins Punkt 2
   10-l-Spritze (0,2-l-Einteilung) mit Nadel (gerades Ende) oder vorzugsweise ein automatisches Auftraggerät (50 l), derart am Stativ befestigt, daß die Platte unter Stickstoff gehalten werden kann.
10. 4.1.3.4 Punkt eins Punkt 3
    Kieselgel-Fertigplatten von 0,25 mm Dicke auf Kunststoffilm 20 = 20 cm (Macherey und Nagel Kieselgel G-HR oder ähnliches).
11. 4.2.4 Punkt 2
    Zentrifuge 4 000 U/min.
12. 4.3.4 Punkt 3
    Zentrifugierröhrchen 10 ml mit Schraubverschluß.
13. 5.Ziffer 5
    ARBEITSWEISE
14. 5.1.5 Punkt eins
    Vorbehandlung der Proben

    Die aus der Tubenöffnung austretenden ersten 2 oder 3 cm Creme werden entfernt.

    In ein vorher mit Stickstoff durchspültes Zentrifugierröhrchen (4.3) werden 300 mg Ascorbinsäure, 6 g Creme oder 3 g homogenisierte Flüssigkeit gegeben.

    Liegt der pH-Wert unter 10, so werden einige Tropfen des 25%igen Ammoniaks hinzugefügt und das Zentrifugierröhrchen mit 96%igem Äthanol (3.3) auf 10 ml aufgefüllt.

    Unter Stickstoff homogenisieren, das Röhrchen verschließen und 10 Minuten lang bei 4 000 U/min. zentrifugieren.

    Die obenschwimmende Lösung verwenden.
15. 5.2.5 Punkt 2
    Chromatographie
16. 5.2.1.5 Punkt 2 Punkt eins
    Auftragen

    Unter Stickstoff auf eine Kieselgelplatte (4.1.3) an neun Punkten 1 l von jeder der beschriebenen Vergleichslösungen auftragen. Diese werden wie folgt verteilt:

Außerdem werden jeweils am 10. und am 11. Punkt 2 l der nach 5.1 vorbehandelten Proben aufgetragen.

1. 5.2.2.5 Punkt 2 Punkt 2
   Entwicklung

   Die Platte wird in einen vorher mit Stickstoff gereinigten und mit den Dämpfen eines der vier geeigneten Lösungsmittel (3.22) gesättigten Behälter eingehängt und bei Raumtemperatur und Dunkelheit so lange entwickelt, bis sich die Lösungsmittelfront etwa 15 cm vom Startpunkt entfernt hat.

   Nunmehr die Platte herausnehmen und unter Stickstoff bei Raumtemperatur trocknen.
2. 5.2.3.5 Punkt 2 Punkt 3
   Nachweis

   Die Platte mit einem der in 3.23 genannten vier Nachweismittel besprühen.
3. 5.2.4.5 Punkt 2 Punkt 4
   Identitätsprüfung

   Man vergleicht die Rf und die an jeder Probe erhaltenen Färbungen mit denen der Vergleichssubstanzen. In Tabelle I sind die Rf und Färbungen angegeben, wie sie mit den einzelnen Lauf- und Nachweismitteln für jede Probe erzielt wurden.Man vergleicht die Rf und die an jeder Probe erhaltenen Färbungen mit denen der Vergleichssubstanzen. In Tabelle römisch eins sind die Rf und Färbungen angegeben, wie sie mit den einzelnen Lauf- und Nachweismitteln für jede Probe erzielt wurden.

   Läßt die Identitätsprüfung Zweifel aufkommen, so kann zuweilen dadurch Klarheit erzielt werden, daß man der Probe die entsprechende Vergleichssubstanz hinzufügt.
4. 5.2.5.5 Punkt 2 Punkt 5
   Halbquantitative Bestimmung

   Man vergleicht visuell die Intensität der Flecken der einzelnen nach 5.2.4 nachgewiesenen Substanzen mit einer geeigneten und bekannten anhand der entsprechenden Vergleichssubstanz gewonnenen Standardkonzentration.

   Ist die Konzentration des Bestandteils der Probe zu hoch, so muß die zu chromatographierende Lösung verdünnt und eine neue Bestimmung vorgenommen werden.

Anmerkungen:

1. 1.Ziffer eins
   OPD wurde nur schwach sichtbar, für eine deutliche Trennung von OTD muß das Lösungsmittel (3.22.3) verwendet werden.
2. 2.Ziffer 2
   *) zeigt den besten Nachweis an.

1. 6.Ziffer 6
   ZWEIDIMENSIONALE DÜNNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNG

   Zu der hier beschriebenen zweidimensionalen Dünnschichtchromatographie werden nachstehende Reagenzien gebraucht:
2. 6.1.6 Punkt eins
   Vergleichssubstanzen und -lösungen
3. 6.1.1.6 Punkt eins Punkt eins
   -Naphthol (-N)
4. 6.1.2.6 Punkt eins Punkt 2
   2-Aminophenol (OAP)
5. 6.1.3.6 Punkt eins Punkt 3
   3-Aminophenol (MAP)
6. 6.1.4.6 Punkt eins Punkt 4
   4-Aminophenol (PAP)
7. 6.1.5.6 Punkt eins Punkt 5
   2-Nitro-p-Phenylendiamin (2 NPPD)
8. 6.1.6.6 Punkt eins Punkt 6
   4-Nitro-o-Phenylendiamin (4 NOPD)

   Von diesen zusätzlichen Vergleichssubstanzen wird eine 0,5 %ige Lösung (m/v) nach 3.2.1 hergestellt.
9. 6.2.6 Punkt 2
   Laufmittel
10. 6.2.1.6 Punkt 2 Punkt eins
    25%iges Äthylacetat-Cyclohexan-Ammoniak (65-35-0,50) (v/v/v)
11. 6.3.6 Punkt 3
    Nachweismittel

    Ein Glasgefäß in einen Entwicklungsbehälter für Dünnschichtchromatographie bringen, etwa 2 g kristallisiertes Jod hineingeben und den Behälter schließen.
12. 6.4.6 Punkt 4
    Chromatographie
13. 6.4.1.6 Punkt 4 Punkt eins
    Wie auf Figur 1 angegeben, zwei Linien auf der Adsorptionsschicht einer dünnschichtchromatographischen Platte einzeichnen (4.1.3).
14. 6.4.2.6 Punkt 4 Punkt 2
    Unter Stickstoff (4.1.1) auf den Startpunkt 1 (Figur 1) bis 4 l Extrakt (5.1) auftragen. Die Menge hängt von der Intensität der auf dem Chromatogramm (5.2) erhaltenen Flecken ab.
15. 6.4.3.6 Punkt 4 Punkt 3
    Die nachgewiesenen beziehungsweise nach Punkt 5.2 vermeintlich nachgewiesenen oxidierenden Farbstoffe je zur Hälfte auf die Punkte 2 und 3 (Figur 1) auftragen. Der Abstand zwischen diesen Punkten beträgt 1,5 cm. Von sämtlichen Referenzlösungen mit Ausnahme von DAP 2 l auftragen, von DAP werden 6 l benötigt. Dies muß in Stickstoffatmosphäre geschehen.
16. 6.4.4.6 Punkt 4 Punkt 4
    Den unter 6.4.3 beschriebenen Vorgang bei den Startpunkten 4 und 5 (Figur 1) wiederholen und die Platte bis zur Durchführung der Chromatographie in Stickstoffatmosphäre aufbewahren.
17. 6.4.5.6 Punkt 4 Punkt 5
    Einen Chromatographierbehälter mit Stickstoff durchblasen und eine geeignete Menge Entwicklungslösung (3.22.2) einfüllen. Die Platte (6.4.4) in den Behälter stellen und bei Dunkelheit in der ersten Laufrichtung chromatographieren (Figur 1). Solange chromatographieren bis die Lösungsmittelfront mindestens 13 cm durchlaufen hat.
18. 6.4.6.6 Punkt 4 Punkt 6
    Die Platte aus dem Behälter nehmen und zur Verdampfung der Lösungsmittelreste wenigstens 60 Minuten lang in den mit Stickstoff ausgeblasenen Behälter legen.
19. 6.4.7.6 Punkt 4 Punkt 7
    Mit einem mit Meßskala versehenen Reagenzglas eine geeignete Menge des Laufmittels (6.2.1) in einem mit Stickstoff ausgeblasenen Behälter eingeben, dann die im Verhältnis zur ersten Elutionsrichtung um 90° gedrehte Platte in den Behälter einsetzen und in der zweiten Richtung bei Dunkelheit chromatographieren, bis die Lösungsmittelfront die auf der absorbierenden Schicht markierte Linie erreicht. Die Platte aus dem Behälter nehmen und das Lösungsmittel an der Luft verdampfen lassen.
20. 6.4.8.6 Punkt 4 Punkt 8
    Die Platte 10 Minuten lang in einem Chromatographierbehälter Joddämpfen (6.3) aussetzen und das zweidimensionale Chromatogramm anhand der zur gleichen Zeit chromatographierten Vergleichssubstanzen auswerten (Tabelle II).Die Platte 10 Minuten lang in einem Chromatographierbehälter Joddämpfen (6.3) aussetzen und das zweidimensionale Chromatogramm anhand der zur gleichen Zeit chromatographierten Vergleichssubstanzen auswerten (Tabelle römisch II).

    Anmerkung

    Die intensivste Färbung der Flecken erhält man, wenn man das Chromatogramm eine halbe Stunde lang nach der Entwicklung der Luft aussetzt.
21. 6.4.9.6 Punkt 4 Punkt 9
    Der Nachweis der nach 6.4.8 gefundenen oxidierenden Farbstoffe läßt sich zweifelsfrei dadurch erbringen, daß man die in 6.4.1 bis 6.4.8 einschließlich beschriebene Behandlung wiederholt, wobei man auf den Startpunkt 1 neben die in 6.4.2 vorgeschriebene Extraktmenge 1 l der in 6.4.8 nachgewiesenen Vergleichssubstanz aufbringt.

    Läßt sich kein anderer Fleck feststellen, so stimmt die Auswertung des ersten Chromatogramms.

TABELLE II
Farben der Vergleichssubstanzen nach Chromatographie und Nachweis durch Joddämpfe

Anlage 10 III. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON NITRITrömisch III. NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON NITRIT A. NACHWEIS

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode kann zum Nachweis von Nitrit in kosmetischen Erzeugnissen verwendet werden, insbesondere in Cremes, Salben und Zahnpasten.
2. 2.Ziffer 2
   PRINZIP DER METHODE

   Nitrit wird durch die Bildung von gefärbten Reaktionsprodukten von 2-Aminobenzaldehyd-phenylhydrazon (Nitrin) nachgewiesen.
3. 3.Ziffer 3
   REAGENZIEN

   Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
4. 3.1.3 Punkt eins
   Verdünnte Schwefelsäure: Verdünne 2 ml konzentrierte Schwefelsäure

         (d = 1,84) mit 11 ml destilliertem Wasser.

1. 3.2.3 Punkt 2
   Verdünnte Salzsäure: Verdünne 1 ml konzentrierte Salzsäure

         (d = 0,19) mit 11 ml destilliertem Wasser.

1. 3.3.3 Punkt 3
   Methanol
2. 3.4.3 Punkt 4
   Lösung von 2-Aminobenzaldehyd phenylhydrazon (Nitrin) in Methanol.

   Wiege 2 g Nitrin in einen 100-ml-Meßkolben. Füge tropfenweise 4 ml verdünnte Salzsäure (3.2) hinzu und schüttle. Fülle bis zur Marke mit Methanol auf und mische bis die Lösung völlig klar ist. Die Lösung wird in einer braunen Glasflasche aufbewahrt (4.3).
3. 4.Ziffer 4
   GERÄTE
4. 4.1.4 Punkt eins
   Becherglas 50 ml
5. 4.2.4 Punkt 2
   100-ml-Meßkolben
6. 4.3.4 Punkt 3
   125 ml braune Glasflasche
7. 4.4.4 Punkt 4
   Glasplatte, 10 x 10 cm
8. 4.5.4 Punkt 5
   Kunststoffspatel
9. 4.6.4 Punkt 6
   Filtrierpapier, 10 x 10 cm
10. 5.Ziffer 5
    DURCHFÜHRUNG
11. 5.1.5 Punkt eins
    Verstreiche einen Teil der zu untersuchenden Probe gleichmäßig auf der Glasplatte, bis zu einer Dicke von nicht mehr als 1 cm.
12. 5.2.5 Punkt 2
    Tränke ein Blatt Filterpapier (4.6) in destilliertem Wasser, lege dieses auf die Probe und drücke das Filterpapier mit einem Plastikspatel an (4.5).
13. 5.3.5 Punkt 3
    Warte einige Minuten und benetze die Mitte des Filterpapiers:

    erst mit 2 Tropfen verdünnter Schwefelsäure (3.1),

    dann mit 2 Tropfen von der Nitrinlösung (3.4).
14. 5.4.5 Punkt 4
    Nach 5 bis 10 Sekunden entferne das Filtrierpapier und betrachte es gegen Tageslicht. Die Anwesenheit von Nitrit wird durch eine purpurrote Färbung angezeigt.

    Bei niedrigen Nitritkonzentrationen verändert sich die purpurrote Farbe nach 5 bis 15 Sekunden in gelb. Wenn hohe Nitritkonzentrationen vorhanden sind, tritt die Farbveränderung erst nach 1 bis 2 Minuten ein.
15. 6.Ziffer 6
    BEMERKUNG

    Die Intensität der purpurroten Farbe und die Zeit bis zur Farbveränderung gibt einen Hinweis auf den Nitritgehalt der Probe.

B. BESTIMMUNG

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH

   Die Methode beschreibt die Bestimmung von Nitrit in kosmetischen Erzeugnissen.
2. 2.Ziffer 2
   BEGRIFFSBESTIMMUNG

   Der Nitritgehalt der Probe, bestimmt nach dieser Methode, wird in % (m/m) Natriumnitrit angegeben.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP DER METHODE

   Die Probe wird mit Wasser verdünnt und geklärt. Das Nitrit wird mit Sulfanilamid und N-1-Naphthyläthylen-Diamin in Reaktion gebracht und die entstehende Färbung bei 538 nm gemessen.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Klärlösungen: Diese Lösungen sind wöchentlich frisch herzustellen.
6. 4.1.1.4 Punkt eins Punkt eins
   Carrez-I-Reagenz:

   106 g Kaliumzyanoferrat (II), K106 g Kaliumzyanoferrat (römisch II), K4Fe(CN)6 3H2O in destilliertem Wasser auflösen und auf 1 000 ml verdünnen.
7. 4.1.2.4 Punkt eins Punkt 2
   Carrez-II-Reagenz:

   219,5 g Zinkazetat, Zn (CH3COO)2 2H2O und 30 ml Eisessig in destilliertem Wasser auflösen und auf 1 000 ml verdünnen.
8. 4.2.4 Punkt 2
   Natriumnitritlösung:

   0,500 g Natriumnitrit in destilliertem Wasser auflösen und auf 1 000 ml verdünnen. Danach 10 ml dieser Stammlösung auf 500 ml verdünnen. 1 ml Lösung = 10 Mikrogramm NaNO2.
9. 4.3.4 Punkt 3
   1 N Natriumhydroxidlösung:

   4,0 g NaOH in destilliertem Wasser auflösen und auf 100 ml verdünnen.
10. 4.4.4 Punkt 4
    0,2%-Sulfanilamid-Hydrochloridlösung:

    2,0 g Sulfanilamid in 800 ml Wasser durch Erwärmen auflösen. Abkühlen, 100 ml konzentrierte Salzsäure unter Rühren hinzufügen und auf 1 000 ml verdünnen.
11. 4.5.4 Punkt 5
    5-n-Salzsäure:

    445 ml konzentrierte Salzsäure

         (d = 1,18) mit Wasser auf 1 000 ml verdünnen.

1. 4.6.4 Punkt 6
   N-1-Naphthyläthylendiamin-Dihydrochloridreagenz

   (Naphthylreagenz):

   Die Lösung ist täglich frisch herzustellen.

   0,1 g N-1-Naphthyläthylendiamin-Dihydrochlorid in Wasser auflösen und auf 100 ml verdünnen.
2. 5.Ziffer 5
   GERÄTE UND HILFSMITTEL
3. 5.1.5 Punkt eins
   Analytische Waage
4. 5.2.5 Punkt 2
   100-, 250-, 500- und 1 000-ml-Meßkolben
5. 5.3.5 Punkt 3
   Vollpipetten oder Meßpipetten
6. 5.4.5 Punkt 4
   100-ml-Meßzylinder
7. 5.5.5 Punkt 5
   Faltenfilter, nitritfrei, Durchmesser 15 cm
8. 5.6.5 Punkt 6
   Wasserbad
9. 5.7.5 Punkt 7
   Spektrophotometer mit 1-cm-Küvetten
10. 5.8.5 Punkt 8
    pH-Meßgerät
11. 5.9.5 Punkt 9
    10-ml-Mikrobürette
12. 5.10.5 Punkt 10
    250-ml-Becherglas
13. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
14. 6.1.6 Punkt eins
    Wiege ungefähr 5 g der homogenisierten Probe auf 0,1 mg genau ein. Überführe sie mit heißem destilliertem Wasser quantitativ in einen 250-ml-Kolben und bringe das Volumen auf ungefähr 150 ml mit heißem destilliertem Wasser. Erwärme den Kolben 1/2 Stunde lang in einem Wasserbad von 80 °C. Während dieser Zeit ist gelegentlich umzuschütteln.
15. 6.2.6 Punkt 2
    Kühle auf Raumtemperatur ab und füge nacheinander unter Umrühren 2 ml Carrez I (4.1.1) und 2 ml Carrez II (4.1.2) zu.Kühle auf Raumtemperatur ab und füge nacheinander unter Umrühren 2 ml Carrez römisch eins (4.1.1) und 2 ml Carrez römisch II (4.1.2) zu.
16. 6.3.6 Punkt 3
    Bringe mit 1-N-Natronlauge (4.3) auf pH 8,3 (pH-Meßgerät benutzen). Überführe den Inhalt quantitativ in einen 250-ml-Meßkolben und fülle zur Marke mit destilliertem Wasser auf.
17. 6.4.6 Punkt 4
    Vermische den Inhalt und filtriere durch ein Faltenfilter (5.5).
18. 6.5.6 Punkt 5
    Pipettiere einen angemessenen aliquoten Teil (V ml) des klaren Filtrats, aber nicht mehr als 25 ml, in einen 100-ml-Meßkolben und fülle destilliertes Wasser bis zu einem Volumen von 60 ml hinzu.Pipettiere einen angemessenen aliquoten Teil (römisch fünf ml) des klaren Filtrats, aber nicht mehr als 25 ml, in einen 100-ml-Meßkolben und fülle destilliertes Wasser bis zu einem Volumen von 60 ml hinzu.
19. 6.6.6 Punkt 6
    Nach dem Durchmischen füge 10 ml Sulfanilamid-Hydrochloridlösung (4.4) und dann 6 ml der 5-n-Salzsäure (4.5) zu. Mische und lasse 5 Minuten stehen. Füge 2 ml des N-1-Naphthyläthylendiaminreagenz (4.6) hinzu, mische und lasse 3 Minuten stehen. Fülle bis zur Marke mit Wasser auf und schüttele durch.
20. 6.7.6 Punkt 7
    Zur Herstellung einer Blindprobe wiederhole die Operationen nach 6.5 und 6.6 ohne Hinzufügung des N-1-Naphthylreagenz (4.6).
21. 6.8.6 Punkt 8
    Bestimme (5.7) die Extinktion bei 538 nm, dabei ist der Blindwert nach 6.7 als Vergleich zu verwenden.
22. 6.9.6 Punkt 9
    Entnehme aus der Eichkurve (6.10) den Natriumnitritgehalt in Mikrogramm pro 100 ml der Lösung (m1 Mikrogramm), die der nach 6.8 gemessenen Extinktion entspricht.
23. 6.10.6 Punkt 10
    Unter Verwendung der 10 g/ml Natriumnitritlösung (4.2) wird eine Eichkurve für die Konzentrationen 0, 20, 40, 60, 80, 100 g Natriumnitrit pro 100 ml hergestellt.
24. 7.Ziffer 7
    BERECHNUNG

    Berechne den Gehalt an Natriumnitrit in % (m/m) nach folgender Formel:

1. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Für einen Gehalt von ungefähr 0,2 % m/m Natriumnitrit darf die Differenz zwischen zwei Parallelbestimmungen den absoluten Wert von 0,005 % nicht überschreiten.

____________

(1) Siehe Norm ISO 5725.

Anlage 11 NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG DES FREIEN FORMALDEHYDS

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH Die Methode beschreibt den qualitativen Nachweis und die quantitative Bestimmung des Formaldehyds in allen kosmetischen Erzeugnissen; sie umfaßt drei Teile:
2. 1.1.eins Punkt eins
   Nachweis
3. 1.2.eins Punkt 2
   Bestimmung der Gesamtmenge durch Kolorimetrie mit Pentan-2,4-Dion (Acetylaceton):

   Diese Methode ist anwendbar, wenn das Formaldehyd einzeln oder mit anderen Konservierungsstoffen, die kein Formaldehyd abspalten, verwendet wird.

   Im gegenteiligen Fall und falls das Ergebnis die im Fertigerzeugnis zulässige Höchstkonzentration übersteigt, ist die folgende Methode zur Bestätigung anzuwenden:
4. 1.3.eins Punkt 3
   Quantitative Bestimmung bei Anwesenheit von Formaldehyd-abspaltenden Stoffen:

   Zunächst ist das freie Formaldehyd vom gebundenen oder polymerisierten Formaldehyd durch Flüssigkeitschromatografie zu trennen. Anschließend ist die Menge nach der vorstehend beschriebenen Methode durch Kolorimetrie zu bestimmen.
5. 2.Ziffer 2
   BEGRIFFSBESTIMMUNG

   Der nach dieser Methode bestimmte Gehalt der Probe an freiem Formaldehyd, ist in Prozent (m/m) anzugeben.
6. 3.Ziffer 3
   NACHWEIS DES FREIEN UND GEBUNDENEN FORMALDEHYDS
7. 3.1.3 Punkt eins
   Prinzip

   Freies und gebundenes Formaldehyd ergeben in schwefelsaurem Milieu in Anwesenheit von Schiffs-Reagenz eine rosa oder lila Färbung.
8. 3.2.3 Punkt 2
   Reagenzien

   Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
9. 3.2.1.3 Punkt 2 Punkt eins
   Fuchsin
10. 3.2.2.3 Punkt 2 Punkt 2
    Natriumsulfithydrat mit 7 H2O
11. 3.2.3.3 Punkt 2 Punkt 3
    Konzentrierte Chlorwasserstoffsäure (d = 1,19)
12. 3.2.4.3 Punkt 2 Punkt 4
    Schwefelsäure, etwa 2 n
13. 3.2.5.3 Punkt 2 Punkt 5
    Schiffs-Reagenz

    In ein Becherglas 100 mg Fuchsin (3.2.1) einwiegen und mit 75 ml auf 80 °C erwärmtem Wasser auflösen. Nach dem Abkühlen 2,5 g Natriumsulfit (3.2.2) und 1,5 ml Chlorwasserstoffsäure (3.2.3) hinzugeben, auf 100 ml auffüllen. Aufbewahrung 2 Wochen.
14. 3.3.3 Punkt 3
    Durchführung
15. 3.3.1.3 Punkt 3 Punkt eins
    In ein 10ml-Becherglas ca. 2 g der Probe einfüllen.
16. 3.3.2.3 Punkt 3 Punkt 2
    Zwei Tropfen H2SO4 (3.2.4) und 2 ml Schiffs-Reagenz (3.2.5) hinzufügen. Dieses Reagenz muß zum Zeitpunkt der Anwendung absolut farblos sein. Schütteln, 5 Minuten stehenlassen.
17. 3.3.3.3 Punkt 3 Punkt 3
    Wird nach 5 Minuten eine rosa oder lila Färbung festgestellt, so liegt die enthaltene Formaldehydmenge über 0,01 %.

    Das freie und gebundene Formaldehyd ist nach Punkt 4 und, wenn nötig, nach Punkt 5 quantitativ zu bestimmen.
18. 4.Ziffer 4
    BESTIMMUNG DER GESAMTMENGE DURCH KOLORIMETRIE MIT PENTAN-2,4-DION (ACETYLACETON)
19. 4.1.4 Punkt eins
    Prinzip

    Das Formaldehyd reagiert mit Pentan-2,4-dion in Anwesenheit von Ammoniumacetat unter Bildung von 3,5-Diacetyl-1,4-Dihydrolutidin. Dieses ist mit 1-Butanol zu extrahieren und die Absorption bei 410 nm zu messen.
20. 4.2.4 Punkt 2
    Reagenzien

    Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
21. 4.2.1.4 Punkt 2 Punkt eins
    Ammoniumacetat, wasserfrei
22. 4.2.2.4 Punkt 2 Punkt 2
    Konzentrierte Essigsäure
23. 4.2.3.4 Punkt 2 Punkt 3
    Frisch unter vermindertem Druck 25 mm Hg25° destilliertes Pentan-2,4-dion (Acetylaceton), das bei 410 nm keinerlei Absorption ergeben darf.
24. 4.2.4.4 Punkt 2 Punkt 4
    1-Butanol
25. 4.2.5.4 Punkt 2 Punkt 5
    n-Chlorwasserstoffsäure
26. 4.2.6.4 Punkt 2 Punkt 6
    Chlorwasserstoffsäure, etwa 0,1 n
27. 4.2.7.4 Punkt 2 Punkt 7
    n-Natriumhydroxid
28. 4.2.8.4 Punkt 2 Punkt 8
    Stärkelösung, frisch hergestellt nach Ph. Eur., (1 g/50 ml Wasser). Zweite Ausgabe 1980, Teil I-VII-1-1.
29. 4.2.9.4 Punkt 2 Punkt 9
    Formaldehyd, 37-40 %ig
30. 4.2.10.4 Punkt 2 Punkt 10
    0,1-n-Jodlösung (genau eingestellt).
31. 4.2.11.4 Punkt 2 Punkt 11
    0,1-n-Natriumthiosulfatlösung (genau eingestellt).
32. 4.2.12.4 Punkt 2 Punkt 12
    Acetylaceton-Reagenz

    In einem 1 000-ml Meßkolben lösen

    • –Strichaufzählung
      150 g Ammoniumacetat (4.2.1),
    • –Strichaufzählung
      2 ml Acetylaceton (4.2.3),
    • –Strichaufzählung
      3 ml Essigsäure (4.2.2).

    Mit Wasser (pH der Lösung etwa 6,4) auf 1 000 ml auffüllen.

    Dieses Reagenz ist stets frisch herzustellen.
33. 4.2.13.4 Punkt 2 Punkt 13
    Reagenz (4.2.12) ohne Acetylaceton.
34. 4.2.14.4 Punkt 2 Punkt 14
    Formaldehyd-Stammlösung

    In eine 1 000 ml-Meßflasche 5 g Formaldehyd (4.2.9) eingeben und auf 1 000 ml auffüllen.

    Bestimmung des Gehalts dieser Lösung: Hierzu 10,00 ml entnehmen, 25,00 ml eingestellter Jodlösung (4.2.10) und 10 ml Natriumhydroxidlösung (4.2.7) hinzugeben.

    5 Minuten stehenlassen.

    11 ml n-HCL (4.2.5) sowie eine Stärkelösung als Indikator hinzugeben und den Überschuß der Jodlösung mittels eingestellter Natriumthiosulfatlösung (4.2.11) titrieren.

    Der Verbrauch von 1 ml 0,1-n-Jodlösung entspricht 1,5 ml HCHO.
35. 4.2.15.4 Punkt 2 Punkt 15
    Formaldhyd-(Anm.: richtig: Formaldehyd-)Vergleichslösung

    Mit entmineralisiertem Wasser zuunächst (Anm.: richtig: zunächst)Anmerkung, richtig: zunächst) eine Lösung 1 : 20 und hiervon eine Lösung 1 : 100 herstellen.

    1 ml dieser Lösung enthält etwa 1 g Formaldehyd.

    Der genaue Gehalt ist zu berechnen.
36. 4.3.4 Punkt 3
    Geräte
37. 4.3.1.4 Punkt 3 Punkt eins
    Übliches Laborgerät.
38. 4.3.2.4 Punkt 3 Punkt 2
    „Phasentrennungs“-Filter WHATMAN 1 PS (oder ein gleichwertiger Filter).
39. 4.3.3.4 Punkt 3 Punkt 3
    Zentrifuge.
40. 4.3.4.4 Punkt 3 Punkt 4
    Wasserbad, 60 °C.
41. 4.3.5.4 Punkt 3 Punkt 5
    Spektrophotometer.
42. 4.3.6.4 Punkt 3 Punkt 6
    1-cm-Glasküvetten.
43. 4.4.4 Punkt 4
    Durchführung
44. 4.4.1.4 Punkt 4 Punkt eins
    Probelösung

    In einen 100-ml-Meßkolben auf 0,001 g genau eine Probenmenge (in g), die einer vermuteten Menge von etwa 150 HCHO entspricht, einwiegen. Mit entmineralisiertem Wasser auf 100 ml auffüllen (S-Lösung).

    (Überprüfen, ob der pH nahe bei 6 liegt, sonst in Chlorwasserstoffsäurelösung (4.2.6) verdünnen).

    In einen 50-ml-Erlenmeyerkolben mit der Pipette eingeben

    • –Strichaufzählung
      10,00 ml der S-Lösung,
    • –Strichaufzählung
      5,00 ml Pentan-2,4-dion Reagenz (4.2.12), mit entmineralisiertem Wasser auf 30 ml auffüllen.
45. 4.4.2.4 Punkt 4 Punkt 2
    Vergleichslösung

    Die eventuelle Interferenz einer Grundfärbung in der Versuchsprobe für den Versuch ist wie folgt zu beseitigen: In einen 50-ml-Erlenmeyerkolben eingeben:

    • –Strichaufzählung
      10,0 ml S-Lösung,
    • –Strichaufzählung
      5,0 ml Reagenz (4.2.13), mit entmineralisiertem Wasser auf 30 ml auffüllen.
46. 4.4.3.4 Punkt 4 Punkt 3
    Blindlösung

    In einen 50-ml-Erlenmeyerkolben eingeben: 5,0 ml Pentan-2,4-dion-Reagenz (4.2.12) und mit entmineralisiertem Wasser auf 30 ml auffüllen.
47. 4.4.4.4 Punkt 4 Punkt 4
    Quantitative Bestimmung
48. 4.4.4.1.4 Punkt 4 Punkt 4 Punkt eins
    Die Erlenmeyerkolben nach 4.4.1, 4.4.2 und 4.4.3 schütteln und 10 Minuten lang in ein Wasserbad von 60 °C eintauchen. Zwei Minuten in einem Kühlbad abkühlen lassen.
49. 4.4.4.2.4 Punkt 4 Punkt 4 Punkt 2
    Den Inhalt jeweils in einen 50-ml-Scheidetrichter, der genau 10 ml 1-Butanol (4.2.4) enthält, überführen. Mit 3-5 ml Wasser nachspülen; die Mischung genau 30 Sekunden kräftig schütteln, dann abtrennen.
50. 4.4.4.3.4 Punkt 4 Punkt 4 Punkt 3
    Die Butanol-Phase über „Phasentrennungs“ -Filter (4.3.2) in die Meßküvetten filtrieren. Auch das Zentrifugieren (3 000 g, 5 Min. lang) ist möglich.
51. 4.4.4.4.4 Punkt 4 Punkt 4 Punkt 4
    Die Absorption A1 der Probenlösung nach (4.4.1) gegen den Extrakt der Vergleichslösung nach (4.4.2) bei 410 nm messen.
52. 4.4.4.5.4 Punkt 4 Punkt 4 Punkt 5
    Entsprechend die Absorption A2 der Blindlösung nach (4.4.3) gegen 1-Butanol messen.

1. 4.4.5.4 Punkt 4 Punkt 5
   Eichkurve
2. 4.4.5.1.4 Punkt 4 Punkt 5 Punkt eins
   In einen 50-ml-Erlenmeyerkolben eingeben:

   • –Strichaufzählung
     5,00 ml der verdünnten Stammlösung (4.2.14),
   • –Strichaufzählung
     5,00 ml Acetylaceton-Reagenz (4.2.12), mit entmineralisiertem Wasser auf 30 ml auffüllen.
3. 4.4.5.2.4 Punkt 4 Punkt 5 Punkt 2
   Weiter nach (4.4.4.5) verfahren; die Absorption gegen 1-Butanol (4.2.4) messen.
4. 4.4.5.3.4 Punkt 4 Punkt 5 Punkt 3
   Das Verfahren mit 10, 15, 20, 25 ml verdünnter Stammlösung (4.2.14) wiederholen.
5. 4.4.5.4.4 Punkt 4 Punkt 5 Punkt 4
   Den Nullwert (entsprechend der Färbung der Reagenzien) wie in (4.4.4.5) bestimmen.
6. 4.4.5.5.4 Punkt 4 Punkt 5 Punkt 5
   Die Eichkurve nach Substraktion des Null-Wertes von den Absorptionswerten nach (4.4.5.1) und (4.4.5.3) zeichnen. Das Beersche Gesetz gilt bis 30 g Formaldehyd.
7. 4.5.4 Punkt 5
   Darstellung der Ergebnisse
8. 4.5.1.4 Punkt 5 Punkt eins
   A2 von A1 abziehen und aus der Eichkurve (4.4.5.5) die in der Lösung (4.4.1) enthaltene und in g Formaldehyd ausgedrückte Menge C ablesen.
9. 4.5.2.4 Punkt 5 Punkt 2
   Den Formaldehydgehalt der Probe (% m/m) nach folgender Formel berechnen:

1. mLitera m
   = Masse der Probenahme in g.

1. 4.6.4 Punkt 6
   Wiederholbarkeit (1)

   Bei einem Formaldehydgehalt von 0,2 % darf die Differenz der Ergebnisse von zwei parallel durchgeführten quantitativen Bestimmungen 0,005 % bei der kolorimetrischen Methode mit Acetylaceton nicht überschreiten.

   Falls die Ergebnisse der quantitativen Bestimmung des freien Formaldehyds über den in der Verordnung über das Verbot und die Beschränkung von Stoffen für kosmetische Mittel, BGBl. Nr. 339/1994 i.d.j.g.F., festgelegten Werten liegen, d. h.:Falls die Ergebnisse der quantitativen Bestimmung des freien Formaldehyds über den in der Verordnung über das Verbot und die Beschränkung von Stoffen für kosmetische Mittel, Bundesgesetzblatt Nr. 339 aus 1994, i.d.j.g.F., festgelegten Werten liegen, d. h.:

   1. a)Litera a
      zwischen 0,05 % und 0,2 % bei einem Produkt, bei dem der Formaldehydgehalt nicht auf dem Etikett angegeben ist,
   2. b)Litera b
      über 0,2 % bei einem Produkt, bei dem der Formaldehydgehalt angegeben bzw. nicht angegeben ist,

   ist nach der unter Punkt 5 beschriebenen Methode zu verfahren.
2. 5.Ziffer 5
   QUANTITATIVE BESTIMMUNG BEI ANWESENHEIT VON FORMALDEHYD ABSPALTENDEN STOFFEN
3. 5.1.5 Punkt eins
   Prinzip

   Das freie Formaldehyd ist durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie abzutrennen. Um eine Spaltung der HCHO-abspaltenden Stoffe bei der Derivatisierung zu vermeiden, ist vorher eine Flüssigkeitschromatographie durchzuführen; das abgespaltene Formaldehyd ist durch Kettenreaktion mit dem Acetylaceton in einem Nach-Säulen-Reaktor in gelbes Lutidin-Derivat umzuwandeln; das entstandene Derivat ist durch Absorption bei 420 nm nachzuweisen.
4. 5.2.5 Punkt 2
   Reagenzien

   Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
5. 5.2.1.5 Punkt 2 Punkt eins
   Baker-Wasser oder Wasser gleichwertiger Qualität.
6. 5.2.2.5 Punkt 2 Punkt 2
   Ammoniumacetat, wasserfrei.
7. 5.2.3.5 Punkt 2 Punkt 3
   Konzentrierte Essigsäure.
8. 5.2.4.5 Punkt 2 Punkt 4
   Acetylaceton (bei 4 °C aufzubewahren).
9. 5.2.5.5 Punkt 2 Punkt 5
   Dinatriumphosphat, wasserfrei.
10. 5.2.6.5 Punkt 2 Punkt 6
    Orthophosphorsäure, 85 % (d = 1,7)
11. 5.2.7.5 Punkt 2 Punkt 7
    Methanol, Spektrographie-Qualität.
12. 5.2.8.5 Punkt 2 Punkt 8
    Dichlormethan, Spektrographie-Qualität.
13. 5.2.9.5 Punkt 2 Punkt 9
    Formaldehyd, 37 – 40 %ig.
14. 5.2.10.5 Punkt 2 Punkt 10
    n-Natriumhydroxid.
15. 5.2.11.5 Punkt 2 Punkt 11
    n-Chlorwasserstoffsäure.
16. 5.2.12.5 Punkt 2 Punkt 12
    0,002-Chlorwasserstoffsäure.
17. 5.2.13.5 Punkt 2 Punkt 13
    Stärkelösung.
18. 5.2.14.5 Punkt 2 Punkt 14
    0,1 n-Jodlösung (genau eingestellt).
19. 5.2.15.5 Punkt 2 Punkt 15
    0,1 n-Natriumthiosulfatlösung (genau eingestellt).
20. 5.2.16.5 Punkt 2 Punkt 16
    Mobile Phase: 0,006 M Dinatriumphosphat (5.2.5) in wässriger Lösung auf pH 2,1 eingestellt mit Orthophosphorsäure (5.2.6).
21. 5.2.17.5 Punkt 2 Punkt 17
    Nach-Säulen-Reagenz

    In einem 1 000-ml-Meßkolben lösen:

    • –Strichaufzählung
      62,6 g Ammoniumacetat (5.2.2),
    • –Strichaufzählung
      7,5 ml Essigsäure (5.2.3),
    • –Strichaufzählung
      5 ml Acetylaceton (5.2.4)

    Mit Wasser (5.2.1) auf 1 000 ml auffüllen.

    Unter Lichtabschluß aufbewahren.

    Haltbarkeit: 3 Tage.
22. 5.2.18.5 Punkt 2 Punkt 18
    Formaldehyd-Stammlösung

    In eine 1 000-ml-Meßflasche 10 g Formaldehyd (5.2.9) eingeben und auf 1 000 ml auffüllen. Bestimmung des Gehalts dieser Lösung: hierzu 5,00 ml entnehmen, 25 ml eingestellte Jodlösung (5.2.14) und 10 ml Natriumhydroxidlösung (5.2.10) hinzugeben.

    Fünf Minuten stehenlassen.

    11 ml n-HCL (5.2.11) sowie eine Stärkelösung als Indikaktor hinzugeben und den Überschuß der Jodlösung mittels Natriumthiosulfatlösung (5.2.15) titrieren.

    Der Verbrauch von 1 ml 0,1-n-Jodlösung entspricht 1,5 mg Formaldehyd.
23. 5.2.19.5 Punkt 2 Punkt 19
    Formaldehyd-Vergleichslösung

    Von der Stammlösung in der mobilen Phase (5.2.16) eine Lösung 1/100 herstellen.

    1 ml dieser Lösung enthält etwa 37 g Formaldehyd. Der genaue Gehalt ist zu berechnen.
24. 5.3.5 Punkt 3
    Geräte
25. 5.3.1.5 Punkt 3 Punkt eins
    Übliches Laborgerät.
26. 5.3.2.5 Punkt 3 Punkt 2
    Eine pulsationsfreie HPLC-Pumpe (Applied Biosystems Pumpe, oder gleichwertige Pumpe)
27. 5.3.3.5 Punkt 3 Punkt 3
    Eine pulsationsfreie Niederdruckpumpe für das Reagenz (oder eine zweite HPLC-Pumpe, wie unter 5.3.2)
28. 5.3.4.5 Punkt 3 Punkt 4
    Ein Einspritzventil mit einer Schleife von 10 l (Valco oder gleichwertiges Einspritzventil)
29. 5.3.5.5 Punkt 3 Punkt 5
    Ein nach-Säulen-Modul (Applied Biosystems PCRS 520 oder gleichwertiges Modul) mit einem 1-ml-Reaktor

    oder

    Ein 1-l-Kolben mit drei Rohransätzen RIN 3

    1. ++
       1-l-Kolbenheizgerät
    2. ++
       zwei Vigreux-Kolonnen 10 Böden 2 RIN 3 (luftgekühlt)
    3. ++
       rostfreies Rohr (für den thermischen Austausch) 1,6 mm – Innendurchmesser 0,23 mm, L = 400 mm
    4. ++
       Teflonrohr 1,6 mm – Innendurchmesser 0,30 mm. L = 5 m (siehe Anlage 2)
    5. ++
       1 T-Stück ohne Totvolumen (Valco oder gleichwertiges T-Stück)
    6. ++
       3 UNION-Verbindungsstücke ohne Totvolumen.
30. 5.3.6.5 Punkt 3 Punkt 6
    Acrodisch RCR 0,45 Filter (Gelman oder gleichwertiger Filter)
31. 5.3.7.5 Punkt 3 Punkt 7
    SEP PAKRC18-Hülse (Waters oder gleichwertige Hülse)
32. 5.3.8.5 Punkt 3 Punkt 8
    Fertigsäulen:

    • –Strichaufzählung
      Bischoff hypersil RP 18 (Typ NC Bezugsnummer C 25.46 1805)

      (5 – L = 250 mm – Innendurchmesser = 4,6 mm)
    • –Strichaufzählung
      oder Dupont, Zorbax ODS

      (5 – L = 250 mm – Innendurchmesser = 4,6 mm)
    • –Strichaufzählung
      oder Phase SEP, spherisorb ODS 2

      (5 – L = 250 mm – Innendurchmesser = 4,0 mm).
33. 5.3.9.5 Punkt 3 Punkt 9
    Vorschaltsäule:

    • –Strichaufzählung
      Bischoff K1 hypersil RP 18 (Bezugsnummer K1 G 6301 1805)

      5 – L = 10 mm, oder gleichwertig
34. 5.3.10.5 Punkt 3 Punkt 10
    Säule und Vorschaltsäule sind durch ein ECOTUBE-System (Bezugsnummer A 15020508 Bischoff) oder ein gleichwertiges System zu verbinden.
35. 5.3.11.5 Punkt 3 Punkt 11
    Der Aufbau erfolgt nach dem als Anlage 2 beigefügten Schema.

    Die Verbindungsstücke hinter dem Einspritzventil müssen so kurz wie möglich sein.

    Bei Verwendung von (5.3.6) dient das rostfreie Rohr zwischen Reaktorausgang und Detektoreingang zur Kühlung des Gemisches vor dem Nachweis.

    In diesem Fall ist die in dem Detektor herrschende Temperatur unbekannt aber konstant (Länge und Durchmesser des Rohres konstant, Durchfluß konstant, Temperatur oberhalb konstant 100 °C, konstante Raumtemperatur während der gesamten Zeit der quantitativen Bestimmung).
36. 5.3.12.5 Punkt 3 Punkt 12
    Detektor, UV, sichtbar.
37. 5.3.13.5 Punkt 3 Punkt 13
    Aufzeichnungsgerät.
38. 5.3.14.5 Punkt 3 Punkt 14
    Zentrifuge.
39. 5.3.15.5 Punkt 3 Punkt 15
    Ultraschall-Bad.
40. 5.3.16.5 Punkt 3 Punkt 16
    Vibrationsmischer (Typ Vortex oder gleichwertiger Vibrationsmischer).
41. 5.4.5 Punkt 4
    Durchführung
42. 5.4.1.5 Punkt 4 Punkt eins
    Eichkurve

    Die Standardlösungen werden durch Verdünnung der Formaldehyd-Vergleichslösung (5.2.19) mit der mobilen Phase (5.2.16) hergestellt.

    • –Strichaufzählung
      1 ml der Standardlösung (5.2.18) verdünnt auf 20 ml (ungefähr 185 g/100 ml),
    • –Strichaufzählung
      2 ml der Standardlösung (5.2.18) verdünnt auf 20 ml (ungefähr 370 g/100 ml),
    • –Strichaufzählung
      5 ml der Standardlösung (5.2.18) verdünnt auf 25 ml (ungefähr 740 g/100 ml),
    • –Strichaufzählung
      5 ml der Standardlösung (5.2.18) verdünnt auf 20 ml (ungefähr 925 g/100 ml).

    Die Standardlösungen sind eine Stunde lang bei Labortemperatur aufzubewahren und müssen frisch hergestellt sein.

    Die Linearität der Eichkurve gilt für Konzentrationen von 1,0 bis 15 g pro ml.
43. 5.4.2.5 Punkt 4 Punkt 2
    Herstellung der Proben
44. 5.4.2.1.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt eins
    Emulsionen (Cremes, Grundierungen, Eyeliner)

    In eine Stöpselflasche eine Masse (m) von ungefähr 0,001 g der Versuchsprobe (in g) einwiegen, die einer vermuteten Formaldehydmenge von ungefähr 100 g entspricht.

    20 ml Dichlormethan und 20 ml Chlorwasserstoffsäure (5.2.12) genau abgemessen hinzufügen.

    Im Vibrationsmischer (5.3.16) und im Ultraschallbad (5.3.15) vermischen.

    Die zwei Phasen durch Zentrifugieren (3 000 g in 2 min) trennen.

    Eine Hülse (5.3.7) mit 2 ml Methanol (5.2.7) ausspülen, dann mit 5 ml Wasser (5.2.1) konditionieren.

    4 ml der wässrigen Phase des Extraktes durch die Hülse (5.3.7) fließen lassen, die ersten zwei ml abgießen und den folgenden Teil auffangen.
45. 5.4.2.2.5 Punkt 4 Punkt 2 Punkt 2
    Lotionen, Shampoos

    Eine einer vermuteten Formaldehydmenge von ungefähr 500 g entsprechende Masse (m/einer Probe für den Versuch in g) auf 0,001 g genau einwiegen.

    Mit der mobilen Phase (5.2.16) auf 100 ml auffüllen.

    Die Lösung durch einen Filter (5.3.6) filtrieren und durch eine Hülse (5.3.7), die wie oben vorbereitet wurde, einspritzen bzw. fließen lassen.

    Alle Lösungen sind sofort nach der Zubereitung einzuspritzen.
46. 5.4.3.5 Punkt 4 Punkt 3
    Bedingungen für die Chromatographie

    • –Strichaufzählung
      Durchsatz der mobilen Phase : 1 ml pro Minute,
    • –Strichaufzählung
      Durchsatz des Reagenz : 0,5 ml pro Minute,
    • –Strichaufzählung
      Gesamtdurchsatz am Ausgang des Detektors : 1,5 ml pro Minute,
    • –Strichaufzählung
      eingepritzte (Anm.: richtig: eingespritzte)Anmerkung, richtig: eingespritzte) Menge : 10 l
    • –Strichaufzählung
      Eluierungstemperatur : bei schwierigen Trennvorgängen unbedingt 0 °C. Dazu die Säule in Eiswasser eintauchen : Temperaturausgleich abwarten,
    • –Strichaufzählung
      Temperatur bei der nach-Säulen-Reaktion : 100 °C
    • –Strichaufzählung
      Erfassung : 420 nm

1. 5.5.5 Punkt 5
   Berechnung

   Emulsionen:

   Formaldehydgehalt in % (m/m):

1. mLitera m
   = Masse der für die Untersuchung eingesetzten Probemenge in Gramm (5.4.2.1),
2. CC
   = aus der Eichkurve (5.4.1) abgelesener Formaldehydgehalt in g/100 ml.

1. 5.6.5 Punkt 6
   Wiederholbarkeit (1)

   Bei einem Formaldehydgehalt von 0,05 % darf die Differenz der Ergebnisse von zwei parallel durchgeführten quantitativen Bestimmungen derselben Probemenge 0,001 % nicht überschreiten. Bei einem Formaldehydgehalt von 0,2 % darf die Differenz der Ergebnisse von zwei parallel durchgeführten quantitativen Bestimmungen derselben Probemenge 0,005 % nicht überschreiten.

Anlage I ANFERTIGUNG DER „SCHLANGE“

ZUBEHÖR FÜR DIE HERSTELLUNG DER „SCHLANGE“

• -
  1 Holzspule:

  Außendurchmesser: 5 cm, in der Mitte wird ein 1,5 cm großes Loch gebohrt. Vier Stahlspitzen werden in gleichmäßigen Abständen angebracht (siehe Schema der Spule Abbildung 1 und Abbildung 2). Abstand zwischen zwei Spitzen : 1,8 cm; Abstand vom Mittelloch : 0,5 cm,
• –Strichaufzählung
  1 feste Nadel (Typ Häkelnadel) zur Herstellung der Schlaufen aus dem Teflon-Rohr,
• –Strichaufzählung
  Teflon-Rohr 1,6 mm – Innendurchmesser 0,3 mm – Länge : 5 Meter.

HERSTELLUNG DER „SCHLANGE“

Zu Beginn wird das Teflon-Rohr von oben nach unten in das Mittelloch der Spule geführt (dabei ca. 10 cm des Rohres auf der unteren Seite heraushängen lassen, so daß sich die Kordel während der Herstellung leicht nach unten ziehen läßt), dann für die erste Runde das Rohr um jede der vier Spitzen wickeln (siehe Abbildung 3).

Am Eingang und am Ausgang des Gerätes werden Zwingen und Kompressionsschrauben angebracht, es ist darauf zu achten, daß das Teflon beim Umwickeln nicht beschädigt wird.

Ab der zweiten Reihe wird das Rohr außen um jede Spitze gelegt und dann wie folgt eine Schlaufe gebildet: Mit Hilfe der festen Nadel (siehe Abbildung 4) das Rohr der unteren Reihe über das Rohr der oberen Reihe heben.

Dieser Vorgang ist an jeder der Spitzen unter Einhaltung der Reihenfolge 1 – 2 – 3 – 4 bis zu einer Kordellänge von 5 Metern bzw. bis zur gewünschten Länge zu wiederholen.

Etwa 10 cm des Rohres werden zum Abschluß der Kordel benötigt. Das Rohr durch jede der 4 Schlaufen führen und zum Abschluß der Kordel leicht zusammenziehen.

Anlage II

1. 1Ziffer eins
   = HPLC-Pumpe (5.3.2.)
2. 2Ziffer 2
   = Einspritzventil (5.3.4.)
3. 3Ziffer 3
   = Säule mit Vorsäule
4. 4Ziffer 4
   = Reagenz-Pumpe (5.3.3.)
5. 5Ziffer 5
   = T-Stück ohne Torvolumen
6. 5'Ziffer 5 '
   = T-Stück (Vortex)
7. 6-6'Ziffer 6 -, 6 '
   = Union-Verbindungsstück ohne Totvolumen
8. 7Ziffer 7
   = Strickschlauch
9. 7'Ziffer 7 '
   = Reaktor
10. 8Ziffer 8
    = Dreihalskolben mit siedendem Wasser
11. 9Ziffer 9
    = Kolbenheizgerät
12. 10Ziffer 10
    = Kühler
13. 11Ziffer 11
    = Edelstahlkapillare – Wärmeaustauscher
14. 11'Ziffer 11 '
    = Wärmeaustauscher
15. 12Ziffer 12
    = Detektor UV/VIS
16. 13Ziffer 13
    = Nachsäulen-Modul PCRS 520

______________

(1) Siehe ISO-Norm 5725.

Anlage 12 BESTIMMUNG DES RESORCINGEHALTS IN SHAMPOOS UND HAARLOTIONEN

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH

   Diese Methode beschreibt die gaschromatographische Bestimmung von Resorcin in Shampoos und Haarlotionen. Sie ist für Konzentrationen von 0,1 bis 2,0 Prozent (m/m) im Erzeugnis geeignet.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Der Resorcingehalt in Prozent (m/m) wird durch die Resorcinmenge in der Probelösung definiert, die durch Gaschromatographie unter den festgelegten Bedingungen bestimmt wird.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Resorcin und 3,5-Dihydroxytoluol, das als interner Standard hinzugefügt wurde, werden durch Dünnschichtchromatographie isoliert. Beide Verbindungen werden nach Auskratzen der Dünnschichtplatte mit Methanol extrahiert. Schließlich werden die extrahierten Verbindungen getrocknet, silyliert und durch Gaschromatographie bestimmt.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Salzsäure 25 % (m/m)
6. 4.2.4 Punkt 2
   Methanol
7. 4.3.4 Punkt 3
   Äthanol 96 % (v/v)
8. 4.4.4 Punkt 4
   Kieselgel-Fertigplatten (Kunststoff oder Aluminium) mit fluoreszierendem Indikator und wie folgt entaktiviert: Fertigplatten mit Wasser besprühen, bis sie glänzen. Die besprühten Platten bei Raumtemperatur 1 bis 3 Stunden lang trocknen.

1. 4.5.4 Punkt 5
   Fließmittel; Azeton-Chloroform-Essigsäure (20-75-5) (v/v/v)
2. 4.6.4 Punkt 6
   Resorcin-Standardlösung; 400 mg Resorcin in 100 ml Äthanol 96% auflösen (1 ml entspricht 4 000 g Resorcin).
3. 4.7.4 Punkt 7
   Interne Standardlösung; 400 mg 3,5-Dihydroxytoluol (DHT) in 100 ml Äthanol 96 % (1 ml entspricht 4 000 g DHT) lösen.
4. 4.8.4 Punkt 8
   Standardmischung; 10 ml der Lösung 4.6 und 10 ml der Lösung 4.7 in einem 100-ml-Meßkolben mischen, bis zur Markierung mit Äthanol 96 % auffüllen und mischen (1 ml entspricht 400 g Resorcin und 400 g DHT).
5. 4.9.4 Punkt 9
   Silylierungsmittel:
6. 4.9.1.4 Punkt 9 Punkt eins
   N, 0-bis-(Trimethylsilyl)-Trifluorazetamid (BSTFA)
7. 4.9.2.4 Punkt 9 Punkt 2
   Hexamethyldisilazan (HMDS)
8. 4.9.3.4 Punkt 9 Punkt 3
   Trimethylchlorsilan (TMCS)
9. 5.Ziffer 5
   GERÄTE
10. 5.1.5 Punkt eins
    Übliche Laborgeräte sowie Dünnschicht- und Gaschromatographieausrüstung
11. 5.2.5 Punkt 2
    Laborglas
12. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
13. 6.1.6 Punkt eins
    Vorbereitung der Probe
14. 6.1.1.6 Punkt eins Punkt eins
    Eine Prüfmenge (m Gramm) des Produkts, das etwa 20 bis 50 mg Resorcin enthält, genau in einen 150-ml-Becher einwiegen.
15. 6.1.2.6 Punkt eins Punkt 2
    Mit Salzsäure (4.1) ansäuern, bis die Mischung sauer ist (ca. 2 bis 4 ml sind notwendig), 10 ml (40 mg DHT) der internen Standardlösung (4.7) hinzufügen und vermischen. In einen 100-ml-Meßkolben mit Äthanol (4.3) geben, mit Äthanol bis zur Markierung auffüllen und vermischen.
16. 6.1.3.6 Punkt eins Punkt 3
    250 l der Lösung 6.1.2 als kontinuierliche Linie von etwa 8 cm Länge auf eine entaktivierte Silicafolie (4.4) auftragen.

    Darauf achten, ein möglichst schmales Band zu erhalten.
17. 6.1.4.6 Punkt eins Punkt 4
    250 l der Standardmischung (4.8) in gleicher Weise (6.1.3) auf die gleiche Platte auftragen.
18. 6.1.5.6 Punkt eins Punkt 5
    An zwei Punkten der Startlinie 5 l von jeder der Lösungen 4.6 und 4.7 auftüpfeln, um die Lokalisierung nach der Plattenentwicklung zu erleichtern.
19. 6.1.6.6 Punkt eins Punkt 6
    Die Platte in einem nicht gesättigten Tank mit der Entwicklungslösung 4.5 entwickeln, bis das Lösungsmittel eine Linie 12 cm von der Startlinie entfernt erreicht hat; dies dauert im allgemeinen ca. 45 Minuten. Die Platte an der Luft trocknen und die Resorcin/DHT-Zone unter Kurzwellen-UV-Licht (254 nm) lokalisieren. Beide Verbindungen haben ungefähr die gleichen Rf-Werte. Die Bänder mit einem Bleistift in einem Abstand von 2 mm von der äußeren dunklen Grenzlinie der Bänder markieren. Diese markierte Zone mit der Schere abschneiden und das Adsorptionsmittel durch sorgfältiges Abschaben isolieren. Das Adsorptionsmittel der Bänder jeweils in eine kleine 10-ml-Flasche aufnehmen.
20. 6.1.7.6 Punkt eins Punkt 7
    Das die Probe enthaltende Adsorptionsmittel und das die Standardmischung enthaltende Adsorptionsmittel jeweils wie folgt extrahieren: 2 ml Methanol (4.2) hinzufügen und eine Stunde lang unter ständigem Rühren mit einem magnetischen Rührstab extrahieren. Die Mischung filtrieren und die Extraktion weitere 15 Minuten lang mit 2 ml Methanol wiederholen.
21. 6.1.8.6 Punkt eins Punkt 8
    Das Lösungsmittel der kombinierten Extrakte durch Trocknen über Nacht in einem mit einem geeigneten Trockenmedium gefüllten Vakuum-Exsikkator verdunsten lassen, keine Hitze anwenden.
22. 6.1.9.6 Punkt eins Punkt 9
    Die Rückstände (6.1.8) entweder nach 6.1.9.1 oder 6.1.9.2 silylieren.
23. 6.1.9.1.6 Punkt eins Punkt 9 Punkt eins
    200 l BSTFA (4.9.1) mit einer Mikrospritze hinzufügen und die Mischung in einem geschlossenen Gefäß 12 Stunden bei Raumtemperatur ruhen lassen.
24. 6.1.9.2.6 Punkt eins Punkt 9 Punkt 2
    Nacheinander 200 l HMDS (4.9.2) und 100 l TMCS (4.9.3) mit einer Mikrospritze zum Rückstand (6.1.8) hinzufügen und die Mischung 30 Minuten lang bei 60 °C in einem geschlossenen Gefäß erhitzen. Die Mischung kühlen.
25. 6.2.6 Punkt 2
    Gaschromatographie
26. 6.2.1.6 Punkt 2 Punkt eins
    Bedingungen für die Gaschromatographie

    Die Säule muß eine Auflösung R besser 1,5 zeigen

1. 6.2.2.6 Punkt 2 Punkt 2
   3 l der Lösungen gemäß 6.1.9 in den Gaschromatographen einspritzen. Für jede Lösung (6.1.9) fünf Einspritzungen, die Peakflächen genau messen, den Mittelwert bilden und das Peakflächenverhältnis berechnen: S = Peakfläche Resorcin/Peakfläche DHT.
2. 7.Ziffer 7
   BERECHNUNG

   Die in Massenprozent ausgedrückte (% m/m) Resorcinkonzentration ergibt sich wie folgt:

1. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Für einen Resorcingehalt von 0,5 % darf der Unterschied zwischen Doppelbestimmungen 0,025 % nicht überschreiten.

_____________

(1) Siehe Norm ISO 5725.

Anlage 13 BESTIMMUNG VON METHANOL IM VERHÄLTNIS ZU ÄTHANOL ODER PROPANOL-2

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH

   Diese Methode beschreibt die gaschromatographische Bestimmung von Methanol in allen kosmetischen Mitteln (einschließlich Aerosolen).

   Es können relative Mengen von 0 bis 10 % bestimmt werden.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Der Gehalt an Methanol, der mit dieser Methode bestimmt wird, ist in % (M/M) Methanol, bezogen auf Äthanol oder Propanol-2 anzugeben.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Die Bestimmung wird mit Gaschromatographie durchgeführt.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Es sind analysenreine Reagenzien zu verwenden.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Methanol
6. 4.2.4 Punkt 2
   Äthanol absolutum
7. 4.3.4 Punkt 3
   Propanol-2
8. 4.4.4 Punkt 4
   Chloroform, durch Waschen mit Wasser von Alkoholen befreit
9. 5.Ziffer 5
   GERÄTE
10. 5.1.5 Punkt eins
    Gaschromatograph mit Katharometer-Detektor (für Aerosol-Proben)

    Gaschromatograph mit Flammen-Ionisationsdetektor (für Nicht-Aerosol-Proben)
11. 5.2.5 Punkt 2
    Meßkolben 100 ml
12. 5.3.5 Punkt 3
    Pipetten 2 ml, 20 ml, 0 bis 1,0 ml
13. 5.4.5 Punkt 4
    Injektionsspritzen 0 bis 100 l und 0 bis 5 l (nur für Aerosol-Proben): gasdichte Spezial-Kolbenspritze
14. 6.Ziffer 6
    DURCHFÜHRUNG
15. 6.1.6 Punkt eins
    Vorbereitung der Proben
16. 6.1.1.6 Punkt eins Punkt eins
    Aerosolprodukte werden gemäß Anlage 2 behandelt und anschließend gaschromatographisch nach 6.2.1 bestimmt.
17. 6.1.2.6 Punkt eins Punkt 2
    Die gemäß Anlage 2 behandelten Nicht-Aerosolprodukte werden mit Wasser auf einen Gehalt von 1 bis 2 % Äthanol oder Propanol-2 verdünnt und dann gaschromatographisch gemäß den Bedingungen von 6.2.2 bestimmt.
18. 6.2.6 Punkt 2
    Gaschromatographie
19. 6.2.1.6 Punkt 2 Punkt eins
    Für Aerosolproben ist der Katharometer-Detektor zu verwenden.
20. 6.2.1.1.6 Punkt 2 Punkt eins Punkt eins
    Als Säulenfüllung ist 10 % Hallcomid M 18 auf Chromosorb W AW 100–120 mesh zu verwenden.
21. 6.2.1.2.6 Punkt 2 Punkt eins Punkt 2
    Die Auflösung R muß gleich oder besser als 1,5 sein.

1. 6.2.1.3.6 Punkt 2 Punkt eins Punkt 3
   Die Auflösung kann beispielsweise unter folgenden Bedingungen erzielt werden:

1. 6.2.2.6 Punkt 2 Punkt 2
   Für andere als Aerosolproben ist der Flammenionisationsdetektor zu verwenden.
2. 6.2.2.1.6 Punkt 2 Punkt 2 Punkt eins
   Als Säulenfüllung ist Chromosorb 105 auf Porapak QS zu verwenden.
3. 6.2.2.2.6 Punkt 2 Punkt 2 Punkt 2
   Die Auflösung R muß gleich oder besser als 1,5 sein.

1. 6.2.2.3.6 Punkt 2 Punkt 2 Punkt 3
   Die Auflösung kann beispielsweise unter folgenden Bedingungen erzielt werden:

1. 7.Ziffer 7
   EICHDIAGRAMM
2. 7.1.7 Punkt eins
   Für die gaschromatographischen Bedingungen nach 6.2.1 (Hallcomid-M-18-Säule) sind folgende Standardmischungen zu verwenden. Diese Mischungen sind durch Messungen mit Pipetten herzustellen. Die genaue Menge wird durch sofortiges Wiegen nach jedem Zusatz festgestellt.

2 bis 3 l n GC injizieren gemäß Bedingungen nach 6.2.1. Berechne das Peakflächenverhältnis (Methanol/Äthanol) oder (Methanol/Propanol-2) jeder Mischung und trage es in das Eichdiagramm ein.

1. X–Achse:Ziffer römisch zehn –, A, c, h, s, e, :
   % Methanol im Verhältnis zu Äthanol oder Propanol-2;
2. Y–Achse:Y–Achse:
   Peakflächenverhältnis (Methanol/Äthanol) oder (Methanol/Propanol-2).

1. 7.2.7 Punkt 2
   Für die GC-Bedingungen nach 6.2.2 (Porapak QS oder Chromosorb 105) sind folgende Standardmischungen zu verwenden. Diese Mischungen sind durch Messungen mit einer Injektionsspritze und Pipette herzustellen. Die genaue Menge wird durch sofortiges Wiegen nach jedem Zusatz eingestellt.

2 bis 3 l gemäß Bedingungen nach 6.2.2 injizieren. Peakflächenverhältnis (Methanol/Äthanol) oder (Methanol/Propanol-2) jeder Mischung berechnen. In Eichdiagramm eintragen:

1. X–Achse:Ziffer römisch zehn –, A, c, h, s, e, :
   % Methanol im Verhältnis zu Äthanol oder Propanol-2;
2. Y–Achse:Y–Achse:
   Peakflächenverhältnis (Methanol/Äthanol) oder (Methanol/Propanol-2).

1. 7.3.7 Punkt 3
   Die Eichkurve muß eine Gerade sein.
2. 8.Ziffer 8
   WIEDERHOLBARKEIT (1)

   Bei einem Gehalt an Methanol oder Propanol-2 von 5 % bezogen auf Äthanol darf der Unterschied zwischen Doppelbestimmungen 0,25% nicht überschreiten.

_____________

(1) Siehe Norm ISO 5725.

Anlage 14 QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON DICHLORMETHAN UND 1,1,1-TRICHLORETHAN

1. 1.Ziffer eins
   ANWENDUNGSBEREICH

   Diese Methode beschreibt die quantitative Bestimmung von Dichlormethan (Methylenchlorid) und 1,1,1-Trichlorethan (Methylchloroform).

   Sie ist auf alle kosmetischen Mittel anwendbar, die diese Verbindungen enthalten können.
2. 2.Ziffer 2
   DEFINITION

   Der gemäß dieser Methode bestimmte Gehalt der Probe an Dichlormethan und an 1,1,1-Trichlorethan wird in Masseprozent ausgedrückt.
3. 3.Ziffer 3
   PRINZIP

   Die quantitative Bestimmung beruht auf Gaschromatographie unter Verwendung von Trichlormethan (Chloroform) als internem Standard.
4. 4.Ziffer 4
   REAGENZIEN

   Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
5. 4.1.4 Punkt eins
   Trichlormethan (CHCl3).
6. 4.2.4 Punkt 2
   Tetrachlorkohlenstoff (CCl4).
7. 4.3.4 Punkt 3
   Dichlormethan (CH2Cl2).
8. 4.4.4 Punkt 4
   1,1,1-Trichlorethan (CH3CCl3).
9. 4.5.4 Punkt 5
   Aceton.
10. 4.6.4 Punkt 6
    Stickstoff.
11. 5.Ziffer 5
    GERÄTE
12. 5.1.5 Punkt eins
    Übliches Laborgerät.
13. 5.2.5 Punkt 2
    Gaschromatograph mit Wärmeleitfähigkeitsdetektor.
14. 5.3.5 Punkt 3
    50-100 ml Aufnahmeflasche (siehe Probenahme 5.3, Anlage 1)
15. 5.4.5 Punkt 4
    Druckgasspritze (siehe Probenahmemethode 5.4.2.2, Anlage 2)
16. 6.Ziffer 6
    VERFAHREN
17. 6.1.6 Punkt eins
    Probe ohne Gasüberdruck:

    Die Probe in einen mit einem Stopfen verschlossenen Erlenmeyerkolben genau einwiegen; eine genau gewogene, der vermuteten Menge des in der Probe enthaltenen CH2Cl2 und CH3CCl3 äquivalente Menge CHCl3 (4.1) als internen Standard hinzufügen und gründlich durchmischen.
18. 6.2.6 Punkt 2
    Probe mit Gasüberdruck: In diesem Fall ist die im Kapitel Probenahme beschriebene Methode unter Beachtung folgender Einzelheiten anzuwenden:
19. 6.2.1.6 Punkt 2 Punkt eins
    Nach Überführung der Probe in die Aufnahmeflasche eine der vermuteten Menge des in der Probe enthaltenen CH2Cl2 und/oder CH3CCl3 äquivalente Menge des internen Standards (4.1) hinzufügen und gründlich durchmischen. Das Totvolumen des Ventils der Aufnahmeflasche wird mit 0,5 ml CCl4 (4.2) gespült, das man verdunsten läßt. Die Masse des internen Standards wird durch Differenzwägung der Aufnahmeflasche ermittelt.
20. 6.2.2.6 Punkt 2 Punkt 2
    Das Teflonende der Injektionsspritze wird nach dem Aufziehen der Probe so mit Stickstoff (4.6) gespült, daß vor der Einführung in den Gaschromatographen im Teflonende keinerlei Probenrückstand zurückbleibt.
21. 6.2.3.6 Punkt 2 Punkt 3
    Nach jeder Probenahme ist das Ende des Ventils oder das eventuell benutzte Anschlußstück (mit Hilfe einer Injektionsspritze) mehrere Male mit Aceton (4.5) zu spülen und danach gründlich mit Stickstoff (4.6) zu trocknen.
22. 6.2.4.6 Punkt 2 Punkt 4
    Für jede Analyse sind Messungen anhand von zwei verschiedenen Aufnahmeflaschen und fünf Messungen pro Flasche durchzuführen.
23. 7.Ziffer 7
    CHROMATOGRAPHIE-BEDINGUNGEN
24. 7.1.7 Punkt eins
    Vorsäule

    Material: Edelstahl. Durchmesser: 3 mm oder 6 mm. Länge: 30 cm. Säulenfüllung: Chromosorb, wie für die Herstellung der analytischen Säule verwendet.
25. 7.2.7 Punkt 2
    Säule

    Die stationäre Phase besteht aus Hallcomid M 18 auf Chromosorb. Die Säule muß eine Auflösung R gleich oder besser als 1,5 ergeben.

1. 7.3.7 Punkt 3
   Zum Beispiel führten folgende Säulen zu den gewünschten Ergebnissen: